论文部分内容阅读
目的： 1.探索Hartley雌性豚鼠去除卵巢能否用来建立绝经后肾虚模型； 2.探索Har-tley雌性豚鼠去除卵巢能否用来建立病证结合的绝经后肾虚型原发性骨关节(Prim-ary Osteoarhtritis,POA)模型； 3.探索Hartley雌性豚鼠去卵巢建立绝经后肾虚型POA病症结合模型的较佳月龄。 方法：将59只适应性饲养1周后的7周龄普通级Hartley雌性豚鼠，称体重约为250g±20g，打耳标编号排序，查找随机数字表抽取5只作为正常组直接取材，3月龄时按体重分组并多次随机抽取共27只作为3月龄组，剩余为5月龄组，两组分别随机抽取5只作为对照组，其余随机分为去势(ovariectomy,OVX)组和假手术(sham operation.Sham)组分别为11只。去除双侧卵巢构建绝经后肾虚模型，去势豚鼠构建绝经后肾虚型POA模型。通过观察豚鼠一般情况、行为学表现、体重变化和检测豚鼠血清环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)水平及其比值变化验证肾虚模型；通过连续观察豚鼠阴道脱落细胞动情周期的变化和检测血清雌二醇(estradiol,E2)的浓度验证绝经后模型；通过豚鼠膝关节大体观和石蜡切片HE、甲苯胺蓝和番红固绿染色的组织学镜检及分别由OARSI(Osteoarthritis Research Society International)推荐的关节软骨大体观评分表、改良Mankin评分表和10分滑膜炎组织学评分表半定量评分，判断膝关节病变并验证POA模型。 结果： 1.3、5月龄组中OVX组豚鼠去卵巢后都出现精神萎靡、毛发直立灰暗、发抖畏寒喜暖、卷缩弓背、食欲下降、大便稀溏和抓取无抵抗等肾虚表现，且5月龄OVX组症状更为突出，相对于各自的Sham组和对照组体质量增长缓慢，Elisa结果显示血清E2水平降低，cAMP降低，cGMP升高，cAMP/cGMP显著降低，说明肾虚模型基本建立且为肾阳虚； 2.阴道脱落细胞涂片显示Sham组和对照组有正常动情周期，而3、5月龄组中OVX组动情周期消失且血清E2水平显著低于前两组，说明成功建立绝经后模型； 3.大体观除5月龄OVX组表现出较明显的早中期OA变化，其余各组都基本正常，且OARSI推荐的关节软骨大体观半定量评分也支持这一结果； 4.各组改良的Mankin关节软骨组织学半定量评分和滑膜炎半定量评分对比结果一致：与正常组比较，3、5月龄对照组得分高，P＜0.05;与对照组相比，3、5月龄Sham组得分略偏高， P＞0.05，差异不显著；与Sham组比较，3、5月龄OVX组得分明显偏高，P＜0.05；与3月龄OVX组比较，5月龄OVX组得分偏高更为显著，P＜0.05； 5.与3月龄OVX组比较，5月龄OVX组豚鼠体质量偏低、血清E2水平降低、血清cAMP浓度更低，cGMP浓度升高，cAMP/cGMP显著降低，结果都具有统计学意义。 结论： 1.Hartley雌性豚鼠去除卵巢可成功建立绝经后肾虚模型； 2.Hartley雌性豚鼠去除卵巢可成功建立病证结合的绝经后肾虚型POA模型； 3.5月龄Hartley雌性豚鼠去卵巢建立绝经后肾虚型POA病证结合模型的更为显著。