目的摸索蜂胶黄酮类抗氧化活性成份分离提取条件，并观察分离组分的体外抗氧化和直接清除氧自由基作用。 方法①蜂胶经95％乙醇提取、石油醚脱酯、乙醚萃取，再经硅胶柱层析吸附，用水：甲醇梯度洗脱，收集50～80％甲醇洗脱段合并得蜂胶总黄酮(TFOP)减压浓缩后再进行聚酰胺柱层析，用二氯乙烷-甲醇-丁酮梯度洗脱，结合高效液相色谱(HPLC)分析技术，合并相同组分洗脱液。采用鼠肝匀浆脂质过氧化活性筛选实验确定活性分离组分。②采用化学显色反应进行黄酮类定性研究；采用硝酸铝-醋酸钾比色法，以槲皮素作标样，测定分离组分中的黄酮化合物含量。③测定不同组分在甲醇溶液中的UV光谱，结合加入各种诊断试剂后测得的UV光谱，分析判断分离不同组分的光谱特性。④采用TBA法、黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶法和Fenton反应分别研究有效组分的抗脂质过氧化活性、直接清除超氧阴离子(O-2)和羟自由基(·OH)的能力。 结果①TFOP通过聚酰胺柱层析被初步分离为A、B、C三组分，通过HPLC检测A组分成分复杂，B、C两组分成分较单一。其中B组分的保留时间是2.965min，C组分的保留时间是2.582min。并且均有较强的抑制脂质过氧化活性。②对分离A、B、C三组分进行黄酮类化合物的化学检识反应。盐酸镁粉反应显橙红色，乙酸镁反应显天蓝色荧光，氯化铝反应显黄色荧光，均说明其中含大量黄酮类物质。用槲皮素作标准品测定各组分中黄酮类化合物的含量得出蜂胶总中黄酮占27.49％，蜂胶A中黄酮占54.16％，蜂胶B中黄酮占33.43％，蜂胶C中黄酮占22.49％。③测定B和C组分的UV光谱及加入诊断试剂后的变化显示B和C组分所含黄酮类化合物的光谱特性有所不同，提示其中主要黄酮类物质不同。④抗自由基活性中B组分对O-2的抑制作用最强，C组分抑制·OH的作用最强。其中，A、B、C三组分在5μg/ml对脂质过氧化的抑制率就分别达到73.3％、77.0％、59.4％。B、C两组分抗O-2的IC50分别为26.85μg/ml、69.02μg/ml，抗·OH的IC50分别为9.06μg/ml、6.81μg/ml。 结论1.EEP经硅胶柱层析分离出TFOP后，再经聚酰胺柱层析提纯，初步分离出有较强抗氧化活性的蜂胶黄酮类提取物A、B、C三个组分；2.经HPLC纯度分析，蜂胶黄酮类提取物A组分成分复杂，蜂胶黄酮类提取物B和C两组分均为单一尖峰，提示纯度可能较高；3.蜂胶黄酮类提取物A、B和C三个组分均具有抗氧化活性和氧自由基的直接清除能力。