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研究背景:鼻咽癌（naso Pharyngeal carcinoma,NPC）是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,其肿瘤细胞多呈低分化或未分化状态,与EB病毒相关,并有较高的远处转移率。鼻咽癌的流行地区主要分布在中国和东南亚地区。研究发现我国人群鼻咽癌发病率和死亡率均高于世界平均水平。目前鼻咽癌的发病机制仍不完全清楚,加强鼻咽癌的早期筛查和有效治疗是鼻咽癌防治工作的重要内容。因此,探寻新的鼻咽癌诊断与治疗相关的靶点具有重要意义,可为临床鼻咽癌早期诊断和治疗方案的选择提供重要依据和支持。目的:1.本研究拟通过检测microRNAs（miRNAs）在血浆中的异常表达筛选出鼻咽癌相关的miRNAs作为新的生物学标志物。2.评价血浆miRNAs、EBV-DNA和血清EBV-VCA/IgA在鼻咽癌中的诊断价值;评价血浆两种miRNA联合检测在鼻咽癌诊断中具有的潜在价值。方法:1.通过收集实验组（鼻咽癌患者）和对照组（健康人群）血液标本,提取miRNAs构建文库,进行样本的miRNA全转录组测序,按照筛选标准（Mean CPM＞50,log2绝对值＞1,P＜0.05）,筛选鼻咽癌患者中异常表达的miRNAs。用实时荧光定量PCR（q-PCR）法对筛选的miRNAs进行定量验证。2.采用q-PCR法检测实验组和对照组血浆miRNAs、EBV-DNA的异常表达,采用化学发光法检测两组中血清EBV-VCA/IgA的异常表达。用受试者工作特征曲线（ROC）曲线比较血浆miRNA、EBV-DNA和血清EBV-VCA/IgA在鼻咽癌诊断中的价值。3.用受试者工作特征曲线（receiver o Perator characteristic curve,ROC）和Logistic回归分析评价两种血浆miRNA联合检测在鼻咽癌诊断中的价值。结果:1.经高通量测序筛选,相比于对照组,实验组中显著上调表达的miRNAs有62种,显著下调表达的miRNAs有240种;2.q-PCR检测发现实验组miRNA-28-3p表达低于对照组（11.52±10.82 vs.128.85±228.60,P＜0.05）,差异有统计学意义;实验组miRNA-29b-3p表达明显高于对照组（10.48±9.63 vs.3.47±2.36,P＜0.01）,差异有统计学意义;3.miRNA-28-3p和miRNA-29b-3p在鼻咽癌早期诊断中价值均高于现有标志物血浆EBV-DNA、血清EBV-VCA/IgA。用ROC评价miRNA-28-3p用于鼻咽癌的诊断价值,表明AUC面积为0.7675（95%CI:0.6108～0.9242）,灵敏度为89.1%,特异度为65.2%;用ROC评价miRNA-29b-3p用于鼻咽癌的诊断价值,表明AUC面积为0.7600（95%CI:0.6057～0.9143）,灵敏度为50.5%,特异度为93.2%;用ROC评价EBV-DNA用于鼻咽癌的诊断价值,表明AUC面积为0.5863（95%CI:0.4081～0.7644）,灵敏度为53.8%,特异度为76.9%;用ROC评价EBV-VCA/IgA用于鼻咽癌的诊断价值,表明AUC面积为0.6575（95%CI:0.4862～0.8288）,灵敏度为51.1%,特异度为69.4%。4.Logistic回归模型做单因素分析,显示血浆miRNA-28-3p、miRNA-29b-3p可能是鼻咽癌诊断的影响因素（P＜0.05）,基于偏最大似然估计的前进法向前逐步选择自变量,进行多因素Logistic回归分析建模预测鼻咽癌发生概率,本模型经似然比检验有显著意义（χ~2值为23.779,P＜0.01）,霍斯默-莱梅肖（Hosmer-lemeshow,HL）检验显示P=0.251＞0.05,该模型拟合度较好。5.联合检测血浆miRNA-28-3p和miRNA-29b-3p能够提高鼻咽癌早期诊断价值,AUC为0.888（95%CI:0.786～0.989）;miRNA-28-3P和miRNA-29b-3P联合诊断鼻咽癌的最佳截断值（Cut-off值）为1.9020,约登指数（Youden index,YI）为0.7,对应的灵敏度为85.3%,特异度为85.2%。结论:血浆miRNA-28-3p在鼻咽癌患者组中低表达,血浆miRNA-29b-3p在鼻咽癌患者组中高表达,二者在鼻咽癌早期诊断中的价值均高于血浆EBV-DNA、血清EBV-VCA/IgA,二者联合检测能够提高鼻咽癌早期诊断价值,有望作为鼻咽癌的早期诊断新的生物学标志物。