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金刚藤又名菝葜,为百合科植物西南菝葜SmilaxchinaL.的根茎。具有祛风、活血、解毒等功效,已收载于2010版药典中。因金刚藤总提取物具有良好的抗炎、抗感染、镇痛、降血糖及增强机体免疫力作用等。临床上已广泛用于妇科慢性炎症、附件炎症等,特别是慢性盆腔炎。然而,由于金刚藤物质基础研究薄弱,大大限制了其临床应用。因此,本课题的目的就在于找到一种简单可行的方法完善金刚藤物质基础研究。 金刚藤中化学成分丰富,主要含有黄酮、皂苷、鞣质、多糖等,近些年来,越来越多的研究报道表明金刚藤黄酮类和皂苷类化合物为抗炎的主要活性成分,而尚未见金刚藤多糖治疗作用研究报道。药理学研究表明,多糖是构成生命的四大基本物质之一,多糖在增强免疫力、降低血糖、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗衰老等方面发挥着生物活性作用,其中,免疫调节是植物多糖最主要和最重要的生物活性。正因如此,近年来很多多糖类成分成为药学工作者的研究热点,特别是植物多糖的研究。 因此本课题通过对金刚藤文献系统分析,以慢性盆腔炎发病机理为出发点,以多糖免疫调节活性为导向,初步设计了金刚藤多糖的提取制备工艺,并从机体免疫调节角度研究金刚藤多糖对实验性大鼠慢性盆腔炎的治疗作用,以期为金刚藤治疗慢性盆腔炎的活性部位的开发提供理论依据。其研究摘要如下: 1.工艺研究结果 (1)多糖提取工艺:取金刚藤饮片,加10倍量80%的乙醇浸泡过夜,回流三次,每次1.5小时,收集药渣,挥干乙醇,加12倍量水,80℃水浴提取三次,每次2小时,收集水提液,制备成金刚藤多糖提取液,得率为1.39%。 (2)多糖纯化工艺:制备1.0g生药/ml金刚藤药液,加入适量乙醇,调节醇浓度为80%,室温(25℃)条件下静置12h,过滤,收集沉淀,70℃干燥,即得。粗多糖纯度为51.37%,经大孔树脂纯化后,多糖纯度为60.39%。 2.药效研究结果 依据慢性盆腔炎的发病特点,结合多糖的免疫调节活性,设计了大鼠慢性盆腔炎药理模型,对金刚藤多糖的药理活性进行了研究,并与金刚藤胶囊进行药效对比。结果表明: (1)金刚藤多糖可明显改善苯酚胶浆所致盆腔炎大鼠血液的浓、粘、凝、聚状态。主要表现在:①金刚藤多糖均可显著减小大鼠全血黏度高、中、低三个切变率(P<0.05);②对大鼠血浆黏度也有显著减小(P<0.05)。 (2)金刚藤多糖具有一定的抗炎作用。主要体现在金刚藤多糖可显著下调苯酚胶浆所致盆腔炎大鼠血浆异常升高的TNF-α含量,显著上调异常降低的IL-2含量。 (3)金刚藤多糖具有良好的免疫增强作用。主要体现在金刚藤多糖可显著升高苯酚胶浆所致盆腔炎大鼠血浆IgA、IgG和IgM的含量。 (4)金刚藤多糖具有良好的子宫炎症性损伤修复作用。主要体现在金刚藤多糖可显著修复苯酚胶浆所致大鼠子宫炎症性创面,降低子宫内粘膜肌纤维增生、炎细胞浸润、淋巴滤泡增生等炎性病变。病理形态结果显示,金刚藤多糖对大鼠子宫炎症性损伤具有良好的修复作用。 综上,通过对金刚藤多糖类成分的药效学研究,达到了本实验的预期目的。