镉诱导的背角无齿蚌免疫毒性效应的研究

来源 :山西大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:luo6411465
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本论文为了进一步探明镉(Cadmium,Cd2+)对背角无齿蚌(Anodonta woodiana)鳃、消化腺和血淋巴组织的免疫毒性影响,根据背角无齿蚌96 h Cd2+的半致死浓度,设置了三个浓度(0.5 mg/L、5 mg/L和50 mg/L)胁迫组和一个对照组,分别处理1、4、7和14 d后,采用石蜡切片及苏木素-伊红(H.E.)染色法,从组织病理学水平,观察了不同Cd2+浓度胁迫14 d后背角无齿蚌鳃和消化腺组织损伤情况。测定了鳃、消化腺和血淋巴组织中溶菌酶(LSZ)和酚氧化酶(PO)的活性。最后,采用实时荧光定量PCR技术,检测了免疫相关基因IKK、IκB和NF-κB在鳃、消化腺和血淋巴中的mRNA表达情况。实验结果如下:(1)随着Cd2+胁迫浓度的增大,鳃组织出现上皮细胞肿胀、核溶解、吞噬细胞数量增加和间质明显水肿等损伤现象。消化腺的腺体结构破损,上皮细胞坏死脱落至腺腔。(2)Cd2+胁迫后,背角无齿蚌鳃中LSZ活性呈现剂量依赖性下降的趋势,而消化腺中LSZ活性在胁迫初期第1和4 d基本无显著差异(P>0.05),只有在5 mg/L组胁迫14 d时出现极显著升高(P<0.01),50 mg/L组胁迫7 d时有极显著升高(P<0.01)。血淋巴中LSZ活性在Cd2+胁迫的第1和4 d被诱导(P<0.05,P<0.01),而第7和14 d无显著性差异。鳃和消化腺中PO活性均呈现出随胁迫时间延长逐渐下降的趋势,血淋巴中PO活性随Cd2+浓度的升高呈逐渐下降的趋势。(3)随着Cd2+胁迫时间的延长,背角无齿蚌鳃中IKK、IκB和NF-κB的mRNA表达基本呈现先升后降的趋势。在消化腺中,除IKK和IκB在50 mg/L浓度组呈现先升后降的趋势外,IKK、IκB和NF-κB的mRNA表达基本呈现剂量依赖性下降的趋势。背角无齿蚌血淋巴中,Cd2+胁迫后,IKK、IκB和NF-κB的mRNA表达基本呈现下降趋势。综合以上研究结果得出如下结论:(1)Cd2+对背角无齿蚌进行亚慢性胁迫,会对背角无齿蚌鳃和消化腺组织造成损伤,并且随Cd2+胁迫浓度的增加损伤程度加重。(2)Cd2+胁迫对背角无齿蚌鳃、消化腺和血淋巴组织中LSZ和PO活性的影响存在组织差异性和一定的浓度效应,酶活性的诱导表明机体积极调动自身的免疫防御功能以抵抗Cd2+引起的免疫毒性损伤。(3)Cd2+胁迫后,背角无齿蚌鳃中IKK、IκB和NF-κB的mRNA表达基本呈现先升后降的趋势,消化腺中IKK、IκB和NF-κB的mRNA表达基本呈现剂量依赖性下降的趋势,血淋巴中IKK、IκB和NF-κB的mRNA表达基本呈现下降趋势,说明Cd2+胁迫能从转录水平影响背角无齿蚌免疫相关基因的表达。
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