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1.研究目的 1.1 采用化学性肝损伤和免疫性肝损伤的动物模型研究白藜芦醇的保肝降酶及抗氧化作用。 1.2 初步探讨白藜芦醇对过氧化氢致小鼠肝细胞损伤的保护作用,为开发筛选抗乙肝类中药提供了实验思路和方法。 1.3 观察白藜芦醇对小鼠免疫调节作用,并分析其作用机理。 1.4 初步探讨白藜芦醇体内抗鸭乙型肝炎病毒作用。 2.方法 2.1 白藜芦醇抗化学肝损伤作用的实验研究 2.1.1D—氨基半乳糖致化学性肝损伤模型法 60只小鼠随机分为正常组、模型组、大、小剂量给药组,阳性对照组5个组。白藜芦醇给药组分别按30mg/kg、15mg/kg、7.5mg/kg剂量灌胃给药,阳性对照组予150mg/kg联苯双酯灌胃,正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃,共7d。第6d,模型组和用药组予0.5g/kg剂量D—氨基半乳糖腹腔注射,正常组腹腔注射等体积生理盐水。腹腔注射D—氨基半乳糖24h后,摘眼球取血,用比色分析法测定小鼠血清门冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)的活性,血清、线粒体超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含水量。 2.2 白藜芦醇抗免疫肝损伤作用的实验研究 2.2.1 卡介苗+脂多糖所致肝损伤动物模型法: 以卡介苗+脂多糖所致肝损伤小鼠为动物模型,分为空白对照组、模型对照组、联苯双酯组、白藜芦醇大剂量组、白藜芦醇中剂量组、白藜芦醇小剂量组。空白对照组不造模,尾静脉注射生理盐水,其时间与各造模组注射时间相同,各组均自开始造模第一天起灌胃空白对照组、模型对照组均灌胃生理盐水0.2ml/只/次,C组灌胃联苯双酯,150mg/kg/次;D、E、F组分别灌胃白藜芦醇大、中、小剂量,分别为30mg/kg/d,15mg/kg/d,7.5g/kg/d。各组均每天灌胃1次,共灌胃10天。采用赖氏法测定血清ALT和AST含量。实验结束时即选取肝脏同一部位组织进行病理切片光镜下观察并拍照。制备肝组织匀浆后采用相应试剂盒测定肝组织SOD含量、MDA含量和GSH含量,以硝酸还原酶法测定NO含量。 2.2.2 ConA致肝损伤模型法: 动物随机分6组,每组10只动物,分别为正常对照组、模型对照组、联苯双酯组、白藜芦醇大、中、小剂量组;除正常对照组外,其余小鼠尾静脉注射ConA20mg/kg后,分别于首日上、下午和次日下午各灌胃给药一次。末次给药后4-6h模型组和给药