梨是世界上广泛种植的具有重要经济价值的果树。矮化密植栽培作为当今果树生产的趋势，具有高效、方便管理等优点。目前，实现果树的矮化密植栽培的途径主要是应用矮化砧木或矮生品种，但这两种资源在梨上均十分匮乏，因此，挖掘利用优质基因源，进行优良矮化砧木及矮生品种的选育，对梨生产具有十分重要的意义。　　‘LeNainVert’是西洋梨（PyruscommunisL.）中发现的矮生变异，具有适合矮化密植栽培的紧凑的矮生型树形。研究发现，该受控于显性基因PcDw，目前，关于该基因的序列信息等还不清楚，开发与其紧密连锁的DNA分子标记，可以为PcDw的精细定位以及最终鉴定该基因提供重要依据。本研究利用IIB型限制性内切酶的RAD（RestrictionassociationsiteDNA，2b-RAD)测序技术开发PcDw的单核苷酸多态性（Singlenucleotidepolymorphism，SNP）标记，并对前期研究获得的SSR标记在新的分离群体上进行分析验证。获得的主要结果如下：　　1.基于2b-RAD的SNP位点筛查　　本研究根据分离群体分组分析的原理，以‘矮生梨’（矮生型）ב茌梨’（普通型）和‘2-3’（矮生型）ב绿宝石’（普通型）2个F1杂交分离群体为试材，应用2b-RAD技术分别对来自两个群体的2对矮生型/普通型对比基因池进行基因组测序分析。4个样本（即4个对比基因池）的2b-RAD标签测序文库的测序结果共产生67186260条reads，平均每个样本测序reads数为16796565。将原始reads进行质量过滤后的统计结果表明，每个样本平均获得unique标签数目为86810，平均测序深度为77×，该测序深度能够达到准确分型的标准。SOAP软件定位结果表明，4个测序文库中含有酶切位点的高质量reads占测序原始reads的70%以上，表明测序质量较好。在来自2个不同群体的矮生型基因池与普通型基因池间进行对比分析，初步筛查出SNP位点1317个，其中有8个位于PcDw的定位染色体scaffold00074上。　　2.SNP标记与PcDw的共分离分析　　根据筛查到的8个SNP位点，设计适合高分辨熔解曲线(high-resolutionmelt，HRM)分析的PCR引物在分离群体上进一步分析验证，检测结果表明：在‘矮生梨’ב茌梨’群体（215个杂种后代）上有2个SNP标记、在‘2-3’ב绿宝石’群体（168个杂种后代）上有4个SNP标记表现出与PcDw位点共分离的特性，根据其扩增子的熔解曲线形状差异，可有效地区分矮生型和普通型。在测试的两个群体上均未发现有标记与性状的重组类型。　　3.SSR标记分析　　结合本研究，降本项目组前期研究得到的5个SSR标记在新建的群体上进行验证，进一步证实这些标记的可靠性。其中CN993875在所有分析的群体上均与PcDw位点表现为完全共分离。　　通过2b-RAD测序技术与HRM分析技术相结合，进行果树重要农艺性状分子标记的开发，是一种行之有效的办法。本研究基于这一策略，最终鉴定获得了4个与PcDw基因连锁的SNP标记。这一研究结果将对PcDw基因的精细定位及其候选基因的筛查具有重要意义。