【摘 要】
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目的：通过建立奥沙利铂致CIPN的大鼠模型，观察疼痛行为学变化、背根神经节细胞病理学的改变、血清及背根神经节中神经生长因子和其TrkA受体表达的变化，探讨黄芪桂枝五物汤对奥沙
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目的：通过建立奥沙利铂致CIPN的大鼠模型，观察疼痛行为学变化、背根神经节细胞病理学的改变、血清及背根神经节中神经生长因子和其TrkA受体表达的变化，探讨黄芪桂枝五物汤对奥沙利铂所致慢性CIPN的干预作用及机制。 方法：选用45只成年Wistar雄性大鼠，适应性喂养后随机分为空白组、模型组、中药组。空白组(n=15)予腹腔注射5％葡萄糖注射液2ml/kg，其余各组(n=15)按照4mg/kg，2ml/kg予奥沙利铂腹腔注射，每周2次。同时空白组、模型组予0.9％生理盐水灌胃(1ml/次)，每日1次，中药组予黄芪桂枝五物汤2.48g/ml，10ml/kg灌胃，每日1次。奥沙利铂用药当天，中药在应用奥沙利铂前1小时灌胃。持续给药至26天。每周称重，每日观察大鼠给药后反应。每周进行Von Frey检测和丙酮实验。第26天解剖每组大鼠，4％多聚甲醛心脏灌注，腹主动脉采血，取双侧L4-L5背根神经节。1、检测奥沙利铂及黄芪桂枝五物汤处理后各组大鼠血清中NGF-β水平的变化。2、通过尼氏染色观察大鼠背根神经节的病理变化并测量神经节核仁变化。采用免疫组织化学染色的方法观察各组大鼠背根神经节中NGF-β及TrkA受体的表达情况。3、RT-PCR、qPCR检测各组大鼠背根神经节NGF-β及TrkA受体基因水平的变化。 结果：通过痛觉行为学测定和组织病理学检测证实CIPN模型制备成功。机械疼痛阈值及冷痛觉结果示与空白组相比，模型组明显下降(P＜0.01)，与模型组相比，中药可减轻奥沙利铂引起的机械疼痛致敏(P＜0.01)，但其缓解冷痛觉致敏的作用无明显统计学差异(P＞0.05)。Elisa检测发现奥沙利铂可致血清NGF-β水平明显降低(P＜0.01)，与模型组相比应用黄芪桂枝五物汤则能使之明显回升(P＜0.05)。且各组血清NGF-β的含量与机械痛阈的变化成正相关。光镜观察各组间背根神经节细胞的形态和NGF-β、TrkA受体的表达情况。与空白组相比模型组核仁明显缩小(P＜0.01)，应用中药后能减轻奥沙利铂对核仁大小的影响(P＜0.01)。奥沙利铂导致背根神经节细胞NGF-β、TrkA受体表达下降(P＜0.01)，使用中药后能纠正其表达的下调(P＜0.01)。qPCR结果显示，与空白组相比，应用奥沙利铂后大鼠背根神经节NGF-β mRNA的表达出现下调的趋势而TrkA mRNA的表达则呈现上调(P＞0.05)，与模型组相比，黄芪桂枝五物汤可以上调NGF-β mRNA的表达，而对TrkA的转录无影响(P＞0.05)。 结论：黄芪桂枝五物汤在改善奥沙利铂所致慢性周围神经病变模型大鼠的痛觉过敏和DRG病理改变的同时，可以上调血液及背根神经节中NGF的表达水平，并促使TrkA受体的表达上调，激活NGF-TrkA信号通路，从而发挥保护神经元的作用。
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