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作为心脑血管疾病的独立危险因素之一,血管老化(VA)是高血压(HTN)、动脉粥样硬化和脑卒中等心脑血管疾病发生发展过程中的重要影响因子及推动因素。VA和HTN都与血管树的形态和功能变化有关,主要表现为是血管僵硬度及血管张力增加,弹性减弱等。VA与血压具有双向因果关系,一方面血压升高是VA的临床表现,另一方面长期的HTN又会导致动脉壁损伤,进而促进血管僵硬,加速血管的老化。本研究将VA作为研究目标,通过对临床VA伴HTN患者相关资料的回顾性分析,以及对HTN大鼠VA相关信号通路的挖掘,探讨VA伴HTN患者的中医证素证型分布特征及HTN对VA影响的可能机制,以期为VA的中医药干预研究及作用机制提供借鉴。本研究分为三个部分:文献综述、临床研究和基础研究。1.文献综述 通过对VA与HTN的相互关系以及信号通路相关文献的整理和归纳,了解HTN对VA影响的可能机制;通过对VA中医认识相关文献的复习和总结,初步了解中医对VA的病因病机认识,以及目前中医对VA的防治现状。2.临床研究 血管老化伴高血压患者中医证素分布的回顾性研究目的:通过对VA伴HTN患者相关病例资料的回顾性分析,探究VA伴HTN患者的中医证素分布特征及HTN对VA可能的影响。方法:选择2018年1月至2020年10月中国中医科学院西苑医院老年病科或综合内科收治的60例VA伴HTN的患者作为病例组,同时选择同期住院的60例VA无HTN的患者作为对照组。分析各组患者年龄、高血压分级、入院血压脉压(PP),臂踝脉搏波传导速度(baPWV),钙(Ca)、磷(P)、镁(Mg),肾素(REN),血管紧张素转化酶(ACE),骨钙素(OC),中医证素证型等特点,观察HTN对VA的影响程度及相关指标的变化。结果:中医证素证型表明,VA伴HTN患者中痰浊、血瘀和气虚证素最为常见,分别占53.33%、50%和35%,痰瘀互结证型最多,占比20%。血管僵化度和血清学指标表明,与对照组患者比较,病例组患者baPWV显著增快,PP显著增大。不同中医证型之间比较,阳虚血瘀组患者baPWV显著增快,血清Ca水平升高,气阴两虚组患者血清Mg水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论:痰浊和血瘀是VA伴HTN患者的主要证素特征,证型多见痰瘀互结证。VA伴HTN患者中阳虚血瘀证型VA程度最为严重,其机制可能与机体钙磷镁代谢紊乱,进而导致的血管钙化老化有关。3.基础研究 AngⅡ/NLRP3炎性小体介导高血压大鼠血管老化的机制研究目的:通过观察自发性高血压大鼠(SHR)与对照组大鼠Ang Ⅱ/NLRP3炎性小体信号通路指标的不同表达,探讨HTN对VA影响的可能机制。方法:实验分为Wistar对照组(12周龄)、SHR模型组(20周龄)和WKY对照组(20周龄),180~200g体质量。尾袖法记录血压;胸主动脉和主动脉弓取材,进行HE和Masson染色,光镜下观察主动脉病理形态和血管胶原纤维变化;取胸主动脉进行Ca2+/Mg2+ATP,Na+/K+ATP的酶活性检测,western blot检测各组大鼠血管组织的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)、平滑22蛋白(SM22 α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)、质膜Ca2+-ATP酶3(PMCA3)的蛋白表达变化。结果:HE和Masson染色显示,Wistar对照组大鼠胸主动脉及主动脉弓外膜结构清楚,中膜平滑肌细胞排列规整,内膜较薄;WKY对照组大鼠胸主动脉及主动脉弓中膜平滑肌细胞排列尚整齐,各弹力纤维层排列有序,内膜面尚平整;SHR模型组大鼠胸主动脉及主动脉弓中膜明显增厚,整体结构凌乱,平滑肌细胞层明显增多,各弹力纤维层增厚扭曲,胶原相对含量增多,内膜面皱缩。与Wistar对照组大鼠比较,WKY对照组大鼠主动脉Ang Ⅱ蛋白、NLRP3蛋白、MMP-9蛋白及TIMP-1蛋白表达增多,SM22α蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);SHR模型组大鼠血压显著升高,大鼠主动脉AngⅡ蛋白、NLRP3蛋白、MMP-9蛋白及TIMP-1蛋白表达增多,大鼠主动脉Ca2+/Mg2+ATP酶活性及大鼠主动脉SM22 α蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与WKY对照组大鼠比较,SHR组大鼠血压显著升高,大鼠主动脉AngⅡ蛋白、NLRP3蛋白、MMP-9蛋白表达增多,大鼠主动脉Ca2+/Mg2+ATP酶活性及SM22 α蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:随着年龄增长,VA程度逐渐加重。HTN可导致血管结构改变,血管重塑,进而影响血管功能,诱发并加剧VA。其机制可能与AngⅡ表达的增多,导致NLRP3炎性小体被激活,进一步诱导VSMCs炎症、迁移、增殖相关,并进一步导致表型转化SM22 α表达的减少,ECM合成MMP-9增多,以及调控细胞内Ca2+稳态的Ca2+/Mg2+ATP酶活性降低有关。