禾谷镰刀菌是小麦赤霉病的病原物之一,它所引起的小麦赤霉病会造成小麦产量极大程度减产,同时在侵染过程它中分泌的毒素也会污染籽粒,其中危害最大的是单端孢霉烯类毒素(TRIs)。单端孢霉烯类毒素的合成主要依靠TRI基因簇上分布的基因来完成,Tri6、Tri10是其中的两个转录调控因子,之前研究显示Tri6、Tri10对TRI基因转录的调控存在协同作用。我们对tri6突变体、tri10突变体以及双敲突变体进行转录组分析,重点对转录水平与野生型存在显著差异的基因进行研究,发现这三者2~5倍以上差异基因存在重叠,并且tri6tri10双敲突变体中存在许多转录水平存在明显变化的基因,而这些基因在单敲突变体中转录水平变化并不明显,由此推测Tri6与Tri10之间可能存在协同调控。采用酵母双杂交系统验证发现Tri6、Tri10存在互作,并通过分段双杂的方法证明,是Tri6的N端而不是C端负责与Tri10互作。对Tri6的C端进行生物学分析后发现存在3个C2H2锌指DNA结合Domain,我们构建互补载体,分别对其进行突变,并通过PEG介导转入Tri6突变体中。经过小麦穗接种实验证明,这3个C2H2锌指domain都是禾谷镰刀菌致病力所必需的。同时,tri6突变体中TRI10表达量升高,我们推测其与禾谷镰刀菌应对TRI6缺失时的补救机制有关,因此对TRI10进行过表达,观察提高TRI10表达量对禾谷镰刀菌的影响。通过显微镜观察发现,TRI10过表达菌株中产毒小泡明显增多,DAPI染色后发现细胞核数目也超过野生型,推测禾谷镰刀菌中可能存在一种补救机制,通过TRI10转录水平的上调,引起产毒小泡的增多,从而提高毒素产量。同时我们观察Tri10的亚细胞定位,发现其与毒素合成途径中细胞色素P450单加氧酶Tri1定位存在相似之处。通过对Tri10和Tri1的共定位,推测Tri10存在除转录因子功能以外的其他功能。综合以上实验结果,Tri6的N端负责与Tri10互作,C端对于致病力是必需的。在Tri6存在的情况下,Tri10转录水平的升高能诱导产毒小泡的形成,提高TRI基因表达。