目的：　　目前基因治疗的最大挑战仍然是高效、安全的基因载体和治疗基因的选择。明胶硅氧烷纳米颗粒(GS NPs)具有低毒性，表面易修饰，易于重复合成等优点，由于其表面带有较大量的正电荷，可作为一种潜在的基因载体材料，介导目的基因进入细胞并转染。作为一种非病毒基因载体，其低转染效率是制约因素。本课题通过将细胞穿膜肽Tat修饰到GS NPs表面从而提高转染效率。Tat是一段取自人类免疫性缺陷病毒1(HIV-1)蛋白中的48-62位氨基酸序列(KYGRRRQRRKKRGC)的多肽，含有一定的核定位序列，可诱导蛋白质和DNA进入细胞核区域，并能促进细胞对多种材料的内吞效率。此外，p53作为一种抑癌基因，在正常情况下发挥监测作用，参与细胞对DNA损伤的应答，与细胞周期、凋亡和分化有关。因此采用溶胶-凝胶法合成GS NPs，并通过Tat共价修饰，携载p53基因对肝癌的抑制效果是本课题的主要研究方向。　　方法:　　1）合成纳米明胶硅氧烷，以Tat共价连接修饰得到Tat-GS NPs，通过场发射扫描电镜(FE-SEM)、透射电镜(TEM)、动态光散射粒径分析(DLS)、表面Zeta电位检测、傅立叶变换红外光谱(FTIR)、热重分析仪(TG)等表征方式对其修饰前后的形貌、粒径、表面电位、结构组成、有机物含量等进行分析比较。　　2)凝胶电泳实验检测GS NPs和Tat-GS NPs对pEGFP-C1-p53(pDNA)的包封率、释放性、复合物稳定性进行研究，并通过粒径和电位分析选取进入细胞的较合适的负载量比。　　3)评价Tat修饰前后纳米颗粒的生物相容性;体外转染荧光观察评价其作为基因载体的可行性，并进一步探讨纳米粒子进入细胞情况和逃逸溶酶体情况。　　4)MTT法检测GS NPs、Tat-GS NPs携载p53对肝癌的抑制效果。Hoechst33258凋亡细胞染色和Western blot实验研究其抑癌机理。　　结果与结论:　　1)制备的明胶硅氧烷纳米颗粒及Tat修饰后（简称Tat-GS）呈不规则球状，Tat-GS出现聚集倾向，平均粒径为289nm相比于250nm的GS，有所增大。GS、Tat-GS的表面电位分别为38mV和35mV。　　2)Tat修饰后对pDNA的包封率降低，Tat-GS/p53在质量比为100∶1时才能实现完全包裹，而GS/p53在质量比30∶1下就能完全包裹。但Tat的修饰对其释放性和稳定性基本无影响。且通过粒径、电位分析表明纳米粒子和pDNA在质量比为200∶1时合成的复合物粒径较小，表面呈一定的正电位，有利于细胞的胞吞进入，因此后续纳米复合物均采用200∶1质量比合成。　　3)毒性实验表明GS具有良好的生物相容性，且Tat的修饰几乎对毒性无影响，生物安全性较高，且对pDNA的转染实验表明Tat-GS具有较高的转染效率，其原因是Tat作为一种穿膜肽，具有增强载体复合物进入细胞的能力和逃逸溶酶体的能力。　　4)Tat-GS-p53对肝癌细胞具有更强的抑制效果，其抑癌作用可能是由介导p53蛋白的表达，引起细胞凋亡的作用。