目的:观察小鼠肾脏缺血再灌注后,各个时间组血清中炎性细胞因子白细胞介素-1、肿瘤坏死因子-a、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-6含量和肾脏组织中TLR4 m RNA、TNF-a m RNA、IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2m RNA的水平变化,并初步探讨TLR4与各炎性因子信号在RIRI过程中的作用及相关机制。方法:建立小鼠肾缺血再灌注损伤模型(使健康雄性C57BL/6小鼠双侧肾脏血供中断45分钟,松开夹子使双肾血流重新灌注)。设立正常对照(N)组、假手术(S)组、肾缺血再灌注I/R 4 h组、I/R 12 h组、I/R 24 h组,(S)组除不中断血供,其余操作均同手术组。用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测各实验组血清中IL-1、TNF-a、GM-CSF、IL-6的变化。实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,QRT-PCR)法分别检查各实验组小鼠肾脏组织中TLR4 m RNA、TNF m RNA、IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2 m RNA的表达变化。结果:1.与正常对照组相比较,肾缺血再灌注I/R 4 h组、I/R 12 h组、I/R24 h组血清中IL-1、IL-6、TNF-a、GM-CSF浓度均增高,且各指标的变化趋势基本相似,都在I/R 12h组升高最显著,之后逐渐下降,差别有统计学意义(P<0.05)。2.与正常对照相比较,肾脏组织中TLR4 m RNA、IL-1a m RNA、IL-6m RNA和CSF2 m RNA水平均明显增高,差别有统计学意义(P<0.05),且TLR4 m RNA与各炎性信号呈现相似的变化趋势,均于I/R 12h达到高峰TNF-a水平无显著变化。和(N)组比较,(S)组血清和肾脏组织中各因子含量均没有特别变化。分别进行TLR4 m RNA与IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2 m RNA的线性相关分析,结果显示TLR4 m RNA与IL-1a m RNA呈显著正相关(r=0.793,P=0.002);TLR4 m RNA与IL-6 m RNA呈显著正相关(r=0.759,P=0.004);TLR4 m RNA与CSF2 m RNA呈显著正相关(r=0.772,P=0.003);本研究尚未发现TLR4 m RNA与TNF-a m RNA有相关性(P>0.05)。结论:1.与对照组比较,I/R4h组、I/R 12h组、I/R 24h组血清中TNF-a、IL-1、IL-6、GM-CSF水平升高,12h组升高显著,说明在肾缺血再灌注损伤情况下,TNFa、IL-1、IL-6、GM-CSF参与早期肾脏损伤的发病过程。2.缺血再灌注后肾组织TLR4 m RNA的表达水平和IL-1a m RNA、IL-6m RNA和CSF2 m RNA的表达水平均高于正常对照组,且增高趋势与这几个炎性信号变化一致,均于12h增高最显著,随着再灌注时间延长,表达水平又下降。相关分析表明,缺血再灌注后肾脏组织中TLR4 m RNA的表达水平与IL-1a m RNA、IL-6 m RNA和CSF2 m RNA的表达水平有强相关性,提示Toll样受体可能通过介导炎性反应信号通路参与了肾脏缺血再灌注肾脏的损伤过程,在肾缺血再灌注损伤过程中发挥着重要的调控作用。