牛αs1酪蛋白基因序列指导的人组织型纤溶酶原激活剂突变体微小基因在小鼠乳腺中的表达

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bin52833093
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该课题利用酪蛋白基因表达框架指导组织型纤溶酶原激活剂突变体(LAtPA)微小基因特异地在乳腺中表达,在乳汁中获得LAtPA.用PCR方法从人基因组DNA中扩增5.8Kb人tPA从第 二外显子到第六外显子的基因组片段.将α-sl酪蛋白载体进行改建去掉α-sl酪蛋白基因的翻译起始信号及其以后序列,在下游序列的末端引入XhoI位点以便最终能将用于显微注射的基因片段完整切下而不含载体序列.LAtPA微小基因连入改造后的α-sl酪蛋白载体中,完成乳腺表达载体的构建.将包括α-sl酪蛋白基因的启动子,LAtPA微小基因,α-sl酪蛋白基 因下游调控序列的融合基因显微注射至小鼠的受精卵中,然后移植入受体母鼠输卵管中.
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