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目的:观察妇科实寒证模型大鼠血清及卵巢组织中t-PA、PAI-1的变化及其与生殖内分泌激素的关系，探讨妇科实寒证的发生与纤溶功能的关系，并采用加减温经汤进行干预，探讨加减温经汤对妇科实寒证模型大鼠生殖功能的影响。 方法:选用健康清洁级SD雌性大鼠60只，2月龄，体重200±20g，适应性喂养1周，随机将其分为正常组、模型组、治疗组三组，每组20只。采用冰水冷冻的方法制备妇科实寒证动物模型。自造模第1天开始，治疗组大鼠按3.51g/200g/天的给药标准给予加减温经汤灌胃，1次/日，连续2周。其它两组给予同体积的蒸馏水灌胃。2周后选择动情间期断头处死大鼠。取血，离心，分离血清，采用放射免疫分析法测定血清E2、P、T、FSH、LH的含量;采用双抗体夹心的ABC-ELISA法检测血清t-PA、PAI-1的水平。迅速剖取卵巢，剔除周围组织，右侧卵巢组织放置4％多聚甲醛固定，酒精脱水，二甲苯透明，包埋，5μm切片，HE染色，光镜下观察卵巢组织形态学变化。左侧卵巢组织置于标记的塑料冷冻管内，采用Western Blood方法检测卵巢组织中t-PA、PAI-1的蛋白表达，采用RT-PCR技术检测t-PA mRNA、PAI-1 mRNA表达。 结果: 1、一般情况 模型组大鼠受冻后出现寒战、被毛无光、喜扎堆、蜷缩少动、反应迟钝、爪尾及耳缘皮肤颜色紫暗以及大便稀烂等症状。治疗组上述症状均有明显改善。 2、动情周期 正常组:阴道涂片显示动情周期为100±6.64 h，动情间期31.2±11.2h。具有明显的规律性、周期性变化。模型组:动情周期为115±8.29 h，动情间期50.4±8.64 h，与正常组相比，动情周期明显延长，差异有统计学意义（P＜0.01），动情间期延长，差异有统计学意义（P＜0.01）。治疗组:动情周期为107±8.18h，动情间期为39.6±8.16h。与模型组比较，动情周期变短，差异有统计学意义(P＜0.01)，动情间期变短，差异有统计学意义(P＜0.01)。 3、血清生殖激素含量的变化 与正常组相比，模型组血清E2、P、FSH、LH、T水平下降，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组血清E2、P、FSH、LH、T水平上升，差异有统计学意义(P＜0.05);与正常组相比，治疗组E2、P、FSH、LH、T稍有降低，差异无统计学意义（P＞0.05）。 4、卵巢形态学改变 正常组大鼠卵巢形态正常，各期卵泡均可见;模型组卵巢卵泡数量减少，成熟卵泡罕见，血管管腔狭细;治疗组以上指标有明显改善。 5、血浆t-PA、PAI-1含量的测定 与正常组相比，模型组血浆t-PA水平降低，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组血浆t-PA水平上升，差异有统计学意义(P＜0.01);与正常组相比，治疗组血浆t-PA水平稍低，差异有统计学意义(P＜0.01)。 与正常组相比，模型组血浆PAI-1水平升高，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组血浆PAI-1水平下降，差异有统计学意义(P＜0.01);与正常组相比，治疗组血浆PAI-1水平上升，差异有统计学意义(P＜0.05)。 6、卵巢组织t-PA、PAI-1蛋白表达的变化 与正常组相比，模型组大鼠卵巢组织t-PA表达降低，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组大鼠卵巢组织t-PA表达增高，差异有统计学意义(P＜0.01);与正常组相比，治疗组大鼠卵巢组织t-PA表达稍低，差异无统计学意义(P＞0.05)。 与正常组相比，模型组大鼠卵巢组织PAI-1表达升高，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组大鼠卵巢组织PAI-1表达降低，差异有统计学意义（P＜0.01）;与正常组相比，治疗组大鼠卵巢组织PAI-1表达增加，差异有统计学意义（P＜0.01）。 7卵巢组织t-PA mRNA、PAI-1 mRNA的变化 与正常组相比，模型组大鼠卵巢组织t-PA mRNA表达降低，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组大鼠卵巢组织t-PA mRNA表达增加，差异有统计学意义(P＜0.01);与正常组相比，治疗组大鼠卵巢组织t-PA mRNA表达较低，差异有统计学意义(P＜0.01)。 与正常组相比，模型组大鼠卵巢组织PAI-1 mRNA表达增加，差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比，治疗组大鼠卵巢组织PAI-1mRNA表达降低，差异有统计学意义(P＜0.01);与正常组相比，治疗组大鼠卵巢组织PAI-1 mRNA表达增加，差异有统计学意义(P＜0.01)。 结论: 1妇科实寒证模型大鼠存在生殖内分泌紊乱及卵巢功能障碍 2妇科实寒证模型大鼠存在全身和卵巢局部纤溶功能异常，使血流受阻，引起卵巢血供障碍而影响卵巢功能。提示妇科寒证的发生与全身及卵巢组织局部纤溶功能低下密切相关。其机制可与t-PA、PAI-1的异常表达引起卵巢新生血管抑制和功能障碍相关，此有待进一步证实。 3加减温经汤能改善实寒证模型大鼠纤溶功能，恢复卵巢正常生殖功能，维持生殖内分泌稳态。