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目的:研究兰香草水提取液对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡的影响以及对NOS、MDA、SOD、脑含水量、脑Ca2+含量的作用。
方法:参照改良Pulsinelli四血管阻断法[1]制作大鼠急性脑缺血15min,再灌注24h模型。将SD大鼠随机分为六组:(1)假手术对照组;(2)模型对照组(缺血再灌注24小时);(3)兰香草小剂量治疗组(15g/kg);(4)兰香草中剂量治疗组(30g/kg);(5)兰香草大剂量治疗组(60g/kg);(6)氟桂利嗪阳性对照组(10mg/kg)。其中假手术组只行手术通路,不电凝双侧椎动脉也不夹闭颈总动脉。其余各组均做模型处理。各组于脑缺血再灌注前4天连续灌胃给药,1次/日,第五天缺血前1h及再灌注1h、23h后再次分别给药。各组大鼠处死前经股动脉取血,离心取上清液-20℃保存,用于检测SOD、MDA、NOS含量的变化。取左侧大脑测脑组织含水量及Ca2+含量,右侧大脑用于做HE染色观察脑组织形态学改变、免疫组化法检测海马CA1区Caspase-3表达。
结果:从各项生化指标来看,脑缺血再灌注损伤后,血清中MDA、NOS含量和脑含水量、Ca2+含量明显增高,而SOD活性显著下降,与假手术组相比有明显统计学差异。兰香草三个剂量组和氟桂利嗪均可明显降低MDA的含量,提高SOD的活性。兰香草大、中剂量组和氟桂利嗪可明显降低脑含水量和Ca2+含量,但兰香草小剂量组对此无统计学意义。兰香草大剂量组和氟桂利嗪尚能降低NOS的活性。HE染色组织形态学观察表明,假手术组正常神经元数目减少,细胞体积缩小,核不规则,胞浆中出现空泡。兰香草三个剂量组和氟桂利嗪组病变程度较模型组轻。与假手术组相比,模型组、兰香草各剂量组和氟桂利嗪组Caspase-3表达明显增加;与模型组相比,兰香草各剂量组和氟桂利嗪组能明显抑制Caspase-3表达。
结论:兰香草对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其作用可能与其抗氧自由基脂质过氧化、抑制NOS性和钙超载、抑制凋亡基因蛋白Caspase-3表达有关。