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该研究以粗枝大叶黄杨为试材,研究低温胁迫对其生理特性的影响,并分离其冷诱导基因.主要研究结果如下:(1)粗枝大叶黄杨在低温胁迫下,随胁迫时间的延长,叶片中脂质过氧化物的终产物(MDA)含量明显增加,细胞质膜相对透性(PMP)明显增大;叶绿素(Chl)、类胡萝卜素(Car)含量降低,且其含量的降低与MDA含量增加及PMP升高间呈显著负相关,说明低温胁迫下粗枝大叶黄杨幼苗Chl和Car的降低与生物膜的损伤有关.(2)粗枝大叶黄杨在零上低温时,细胞保护酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性先降低后上升,又下降并维持较高的水平,表明粗枝大叶黄杨对低温胁迫有一定的适应性.在零下低温时,SOD、POD和APX的活性6h内迅速提高后下降,-8℃处理120h后,其活性已受到明显的抑制.(3)在低温环境中,粗枝大叶黄杨的净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs)下降,但胞间CO<,2>浓度反而升高,表明低温导致Pn下降,主要是由非气孔因素引起的.(4)在低温环境中,光系统Ⅱ(PSⅡ)及其电子传递过程受到明显抑制.叶绿素荧光a参数与MDA含量及质膜相对透性的的相关性分析表明,低温胁迫下,PSⅡ原初光能转化受抑制程度与膜脂过氧化存在一定的关系.(5)应用抑制差减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)方法,构建冷诱导表达的正向抑制差减cDNA文库,低温处理的幼苗为tester,常温处理为driver,通过cDNA微阵列差异筛选cDNA文库,得到604个低温诱导或表达增强的候选克隆,对其中的84克隆进行DNA测序,去除冗余的cDNA,在GenBank中进行核酸和蛋白质同源性的比较和功能分析,共有36个单一序列,其中12个cDNA在GenBank数据库没有同源的序列,可能为新基因.全长基因EJ175共有603bp,对其可读阅读框架进行分析,从57-515位核苷酸的一段序列,包含了起始密码子和终止密码子,编码152个氨基酸的多肽.将全长基因序列与Genbank已知序列进行比对,其序列与拟南芥的Pollen allergen-like protein 568bp的编码序列有56﹪的同源性.对该基因可读框编码的蛋白进行结构功能域分析,证实了该基因4-147位氨基酸存在病程关联蛋白Bet v I家族(Pathogenesis-related protein Bet v I family)的的保守结构域Bet-v-I.综合分析,推测该基因属于病程关联蛋白Bet v I家族.