【背景】糖尿病是一种慢性使人衰弱且花费昂贵的疾病,它可导致严重的并发症,包括失明及心脏、肾脏等疾病。目前,全世界大约有2亿人在经受着糖尿病的折磨,而且发病人数到2025年为止,将再增长一倍。糖尿病已经成为患者和社会的一个沉重负担,而且问题日益严重,特别是在发展中国家。通过胰腺或胰岛移植治疗1型糖尿病(IDDM)及部分2型糖尿病(NIDDM)是一个很有吸引力的方法,但供体来源不足及免疫排斥反应的存在大大限制了其临床应用。近年来,随着成体干细胞及多能干细胞等概念的提出,通过干细胞移植治疗糖尿病在世界范围内成为一个新的研究热点。骨髓基质细胞(MSCs)是一种存在于骨髓,具有多向分化潜能的非造血细胞,易于分离培养扩增,遗传背景稳定,由于其取材方便、体外扩增能力强、基因转染效率高、转染后稳定表达、可自体回输从而避免了免疫排斥反应,被认为是细胞工程和基因工程理想的种子细胞,而且能克服胚胎干细胞(ESC)所不能解决的伦理学问题。研究表明,在一定条件下,MSCs能分化形成多种组织。 【目的】本实验通过体外培养MSCs和胰腺基质细胞,在二者传代稳定后,以胰腺基质细胞培养液诱导培养MSCs,探讨一种在体外条件下将MSCs诱导成为胰岛素分泌细胞(IPCs)的简便方法。 【方法】1.取健康成年SD大鼠断髓处死,75%酒精浸泡5min,无菌条件下取出胫骨、股骨,剪去骨骺端,用D-Hanks液冲出骨髓;密度梯度离心法获得单个核细胞,以DMEM/F12全培养基(含碳酸氢钠2.438g/L,胎牛血清100ml/L,青