汞(Mercury,Hg)及其化合物作为环境毒物可对机体的神经系统、肝脏和肾脏等组织系统造成损伤,其中以无机汞(Inorganic mercury,I-Hg)、甲基汞对机体的危害最大。尽管已采取措施减少人为源Hg排放,我国仍是全球大气Hg排放量最大的国家之一。大量的Hg进入生物地化循环,严重威胁着畜禽健康与动物源性食品安全。I-Hg在日常生活与工业生产中具有不可替代的应用,如硫柳汞作为一些疫苗的防腐剂,氯化汞作为氯乙烯合成反应触媒等,大大增加了畜禽I-Hg暴露风险。机体的主要代谢器官肝脏是I-Hg发挥毒性和沉积的重要器官。然而,目前尚缺乏可有效降低I-Hg诱导肝毒性的治疗方法。木犀草素(3’,4’,5,7-四羟基黄酮)是一种具有保健功效的天然黄酮,可从许多的中国传统药用植物中提取出来。近年来,木犀草素因具有增强免疫、清除自由基及抗癌的生物学功效而受到广泛关注。本研究通过建立氯化汞急性中毒小鼠模型,探究木犀草素对I-Hg造成的急性肝损伤的干预作用及其分子机制。体内试验中,取28只6-8周龄健康雄性昆明小鼠,随机分为4组:空白对照组、木犀草素组、氯化汞组及氯化汞+木犀草素组。一次性腹腔注射氯化汞4 mg/kg构建急性肝损伤小鼠模型,次日一次性灌服木犀草素100 mg/kg。末次给药24 h后,取全血与血清进行全血细胞分析及生化检测。取小鼠肝脏进行组织病理学观察,并采用试剂盒法检测其氧化应激指标谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,原位末端转移酶标记技术(terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测肝细胞凋亡,免疫印迹法测定相关蛋白水平,实时定量聚合酶链式反应(quantitative realtime polymerase chain reaction,qPCR)测定肝组织中miR-146a表达水平。体外试验原代培养昆明小鼠肝细胞,分为4组药物处理:对照组、木犀草素组(20μmol/L)、氯化汞组(5μmol/L)及氯化汞(5μmol/L)+木犀草素(20μmol/L)组。木犀草素培养2 h后,再加入氯化汞培养24 h,按照试剂盒说明书操作,测定肝细胞活率和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果表明:(1)根据血常规结果判断,木犀草素减轻了I-Hg致贫血。(2)生化指标检测表明,木犀草素降低了I-Hg致谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性升高。(3)病理切片结果表明,木犀草素减轻了I-Hg致急性肝损伤。(4)GSH与MDA检测结果表明,木犀草素抑制了I-Hg致小鼠肝组织氧化应激水平升高。(5)TUNEL检测结果显示,木犀草素减轻了I-Hg致肝细胞凋亡。(6)蛋白免疫印迹试验结果表明,木犀草素激活I-Hg抑制的核因子E2相关因子(nuclear factor(erythroid-derived 2)-like 2,Nrf2)信号通路,提高代谢相关蛋白水平,包括Nrf2、血红素加氧酶-1、醌氧化还原酶1、Krüppel样因子9、沉默调节因子1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,Sirt1)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,降低I-Hg提高的炎症相关蛋白和促凋亡蛋白水平,包括核因子-κB、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α),磷酸化p38,p53和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白,提高I-Hg降低的抑制凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2水平。(7)qPCR结果表明,木犀草素和氯化汞均不影响Nrf2上游因子miR-146a的表达,揭示木犀草素调控I-Hg抑制的Nrf2信号通路并非通过调控miR-146a。(8)体外试验结果表明,木犀草素减轻了I-Hg致肝细胞活率降低及ROS水平升高。综上所述,木犀草素通过调控Sirt1/Nrf2/TNF-α信号通路减轻I-Hg暴露致急性肝损伤和贫血。食源性摄入木犀草素有望成为畜禽I-Hg中毒防治的新方法和保障动物源性食品安全的新手段。