水芹总酚酸的药理学和双环戊二烯二羧酸的毒性研究

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乙肝作为一种传染性疾病,严重威胁到我们人类的身体健康。目前治疗乙肝的药物很多,本课题组对中药水芹的有效成分水芹总酚酸(OJTPA)的体内体外实验均证明:OJTPA具有较好的抗乙肝病毒的作用,但是其作用机理还不是很清楚,本课题实验将对OJTPA的作用机理进行进一步的探讨,主要研究内容如下:   1、OJTPA对2.2.15细胞周期的影响:细胞周期是细胞从一次分裂结束为起点到下次分裂完成为终点的过程,分为间期(G, S,G2/M)和分裂期。实验结果显示:水芹总酚酸阻滞S期细胞进入G2/M期,导致G1期细胞百分比下降,从而抑制2.2.15细胞的增殖。   2、OJTPA对正常小鼠免疫功能的影响:免疫是机体识别“自己”与“非己”,抵抗或排除外来物质的进入,维持机体健康的过程。实验结果显示:OJTPA可提高正常小鼠血清溶血素和IL-2的含量、促进脾细胞的增殖、提高碳粒廓清指数;这表明OJTPA能够提高正常小鼠的免疫功能。   胶塞作为一种包装医药制品的密封件,已经由原来的天然橡胶塞逐步发展到现在的丁基橡胶塞和卤化丁基橡胶塞,但是在丁基橡胶塞的生产过程中存在边角料难以回收、重复加工利用的问题,造成了原料的浪费。采用具有热可逆性质的双环戊二烯二甲酸钠作为交联剂对丁基橡胶或卤化丁基橡胶进行交联,有望能够解决此问题。以双环戊二烯二羧酸钠为交联剂制备得到的溴化丁基橡胶塞,可能存在交联过程中有部分交联剂未能参与反应,导致胶塞在与药品长期接触过程中,部分交联剂进入药品中产生毒性,所以需要对交联剂本身和双环戊二烯二羧酸钠为交联剂制备得到的溴化丁基橡胶塞(粘土填充体系和炭黑填充体系)进行毒性评价,主要研究内容如下:   1、考察了双环戊二烯二甲酸钠及其衍生物甲基双环戊二烯二甲酸钠的急性毒性,实验结果显示:双环戊二烯二甲酸钠经口的最大耐受量>15g·kg-1,腹腔注射的最大耐受量>500mg·kg-1;小鼠尾静脉注射的最大耐受量>1000mg·kg-1,可知双环戊二烯二甲酸钠毒性属于1级毒性,即无毒;甲基双环戊二烯二甲酸钠经口的LD50为7.98g·kg-1,属于2级毒性,即实际无毒。   2、考察了双环戊二烯二甲酸钠的细胞毒性,实验结果显示:双环戊二烯二甲酸钠的IC50为8.6mg·ml-1,大于食品添加剂苯甲酸钠的IC50,细胞毒性的结果也显示双环戊二烯二甲酸钠毒性极低。   3、考察了双环戊二烯二羧酸钠为交联剂制备得到的溴化丁基橡胶塞的细胞毒性。结果显示:粘土填充的溴化丁基胶塞(clay)和炭黑填充的溴化丁基胶塞(cb)的细胞毒性为1级,传统胶塞的细胞毒性为0级,虽然与传统胶塞相比,用双环戊二烯二甲酸钠作为交联剂的溴化丁基胶塞的毒性有所增加,但是其细胞毒性均<2级,符合安全标准。
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