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目的建立一种用流式细胞术快速检测结核分枝杆菌对异烟肼敏感性的方法。方法1.摸索FDA染料在流式细胞术中鉴别结核分枝杆菌活性的最适作用时间及浓度（前期实验）。利用结核分枝杆菌体内的非特异性酯酶能水解二乙酸荧光素（FDA）的特性，选用FDA作为荧光染料并摸索其在流式细胞术中鉴别结核分枝杆菌活性的最适作用时间及浓度：通过观察结核分枝杆菌株制备的不同比例死活菌（0、25%、50%、75%、100%）菌悬液在相同FDA作用浓度，不同作用时间（10min、20min、30min、40min、50min、60min、70min、80min）以及相同作用时间（60min），不同FDA作用浓度（100、200、250、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100ng/ml）时平均荧光强度MFI（Mean fluorescence intensity MFI）的变化以确定FDA染料在流式细胞术中鉴别结核分枝杆菌活性的最适作用时间及浓度。2.测定结核分枝杆菌对异烟肼（INH）的敏感性。我们首先检测临床分离到的10株结核分枝杆菌对INH的敏感性，根据结核分枝杆菌培养物在不同INH药物浓度（5ug/ml、1ug/ml、0.2ug/ml、0.1ug/ml、0.05ug/ml）作用24、48、72h后所检测到的MFI与阳性对照（未和药物接触菌）的MFI比值，从而初步推断出区分耐药或敏感株的IHN临界浓度及最适培养时间；在此基础上通过检测20例临床分离菌株在缩小药物浓度范围（0.1ug/ml、0.075ug/ml、0.05ug/ml、0.025ug/ml）后所检测到的MFI与阳性对照的MFI比值进一步确定IHN临界浓度，并将30株临床分离的结核分枝杆菌菌株所得流式药敏结果与传统的比例法检测结果进行比较。结果1.经FDA染色后的100%纯活菌,在FDA作用50min以后MFI上升比率快且稳定；进一步观察FDA对不同比例（0、25%、50%、75%、100%）死活菌混悬液分别染色30、45、60min，在作用60min以后MFI值相对稳定；2.经FDA染色后的100%纯活菌，MFI值在FDA作用浓度为300ng/ml时上升比率较快且相对稳定,进一步观察三种FDA浓度（200、250、300ng/ml）对不同比例死活菌混悬液染色60min后，其MFI值在FDA终浓度为250ng/ml时可最大限度区分死活菌。2.以敏感指数（药物管MFI/纯活菌管MFI）大于或等于0.8及IHN临界浓度0.05ug/ml为判断标准，30例临床分离的结核分枝杆菌菌株用流式细胞术的方法检测，有26株的结果与比例法一致，符合率86.7％，经卡方检验后提示该方法与比例法差别无统计学意义（P>0.05）。结论FDA染料在流式细胞术中鉴别结核分枝杆菌活性最适作用浓度为250ng/ml，最适作用时间为60min；初步证实流式细胞术在检测结核分枝杆菌对异烟肼敏感性方面具有简便、快速、准确的优点，但还有待扩大样本量进一步验证。