转录因子Oct4和Sox2是维持细胞自我更新与分化能力的主要调控因子，也是使体细胞发生重编程为多功能诱导干细胞（iPSCs）的关键因素。目前利用转录因子重组蛋白质Oct4和Sox2已经成为一种取代DNA转染，安全诱导iPSCs的最新途径。但是由于重组蛋白质溶解度和纯度较低，降低了诱导效率和iPSCs的质量，所以需要在重组蛋白质表达，纯化方面提出改进方法，以确保重组蛋白质Oct4和Sox2能够高效地进入细胞并充分发挥转录因子的作用。通过对鼠源转录因子Oct4和Sox2的密码子进行改良优化，利用大肠杆菌BL21（DE3）和pET质粒表达系统诱导表达重组蛋白质。利用多步纯化方法和蛋白质阳离子试剂SPDP/PEI600分别提高转录因子重组蛋白质的纯度和浓度。用荧光标识重组蛋白质，并借助Western Blot方法明确其在细胞内的运动情况及稳定程度。利用荧光素酶报告基因和靶基因Nanog的调控序列构建载体，结合稳定细胞株评估转录活性功能。实验结果表明，通过以上方法可以获得较高浓度和较高纯度的两种转录因子重组蛋白质。添加至细胞培养基中的转录因子重组蛋白质可在1-2小时内进入细胞内，并可在细胞内稳定存在36个小时以上。重组蛋白质Oct4和Sox2均可发挥转录因子的功能，激活靶基因Nanog，其中重组蛋白质Oct4能够提高骨髓间充质干细胞增殖和分化能力。制备的较高溶解性，较高纯度，较高效率的重组蛋白质Oct4和Sox2有望提高诱导iPSC的效率，为建立高效率的重组蛋白质诱导iPSC技术奠定物质材料基础。