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目的:恶性肿瘤是当今世界上严重危害人类健康的重大疾病之一,肺癌发病率和死亡率位居恶性肿瘤之首。恶性肿瘤的转移所导致的多脏器功能衰竭是患者死亡的主要原因。目前,临床上防止肿瘤转移是治疗肿瘤的关键之一。随着对肿瘤分子生物学的深入研究,人们发现恶性肿瘤的转移是一个复杂而主动的生物学过程,它包括癌细胞在原发灶增殖、脱落、侵入转移点并增殖,在这个过程中存在着癌基因的激活和抑癌基因的失活等一系列遗传学的改变。Caveolae是细胞膜内陷形成的特殊膜结构,参与细胞的物质运输和信号转导。Caveolin-1是Caveolae中的重要蛋白,与细胞内多种信号分子相互作用。上世纪90年代后期有研究发现,Caveolin-1可以影响细胞的增殖、凋亡、恶性转化及血管的生长,是近年来肿瘤研究的热点之一,但是Caveolin-1与肺癌的相关研究较少,国内外近乎没有系列报道。本文旨在探讨Caveolin-1基因对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446生长和体外侵袭力的影响。方法:western blot检测Caveolin-1在人肺癌细胞系A549、NCI-H460、NCI-H446中的表达。用脂质体法将已构建的Caveolin-1真核表达载体导入到Caveolin-1基因缺失的人小细胞肺癌细胞NCI-H446中,经G418筛选获得可稳定表达Caveolin-1的人小细胞肺癌细胞H-446Cav1阳性克隆和对照阴性克隆H-446neo。western blot和免疫细胞化学方法鉴定阳性克隆。用噻唑蓝(MTT)法观察细胞增殖,结晶紫染色光学显微镜观察细胞形态,用Transwell小室法和划痕实验观察细胞体外侵袭、迁移能力的变化。用western blot和明胶酶谱方法检测Caveolin-1蛋白表达对MMP-3表达及酶活性的影响,用western blot方法检测Caveolin-1表达对E-cadherin表达的影响。结果:western blot检测在人小细胞肺癌细胞NCI-H446中Caveolin-1表达缺失。western blot和免疫组织化学方法鉴定获得稳定表达细胞克隆:阳性克隆H-446Cav1和阴性克隆H-446neo。通过细胞形态学观测发现,转染目的基因后的细胞形态发生了明显改变,转染前NCI-H446细胞较小,伪足短,细胞呈克隆生长;转染后H446-Cav1细胞体积增大,多突起,细胞生长较分散不呈克隆样生长。生长曲线表明H446-Cav1细胞增殖水平明显低于NCI-H446、H446neo细胞(P<0.05)。Transwell实验结果表明H446-Cav1细胞穿透Matrigel胶细胞数较阴性克隆H-446neo明显增多(P<0.05)。细胞迁移实验结果表明H446-Cav1迁移速度明显高于NCI-H446、H446neo细胞(P<0.05)。用western blot检测各细胞上清中MMP-3的表达,H446-Cav1与H446neo相比MMP-3表达明显增高(P<0.05)。明胶酶谱方法检测细胞上清中MMP-3活性,H446-Cav1上清中MMP-3活性明显高于H446neo (P<0.05)。用western blot检测细胞中E-Cadherin的表达,H446-Cav1与H446neo、NCI-H446相比E-Cadherin表达明显降低(P<0.05)。结论:1.人小细胞肺癌细胞系NCI-H446可以作为Caveolin-1基因体外研究的模型。2.Caveolin-1抑制小细胞肺癌细胞生长、增殖。3.Caveolin-1可以提高小细胞肺癌细胞体外侵袭和迁移能力。4. Caveolin-1可能通过下调E-Cadherin的表达和上调MMP-3的表达及提高其活性促进小细胞肺癌细胞体外转移能力。