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目的:检测全身性seipin基因敲除小鼠肝脏组织形态学及病理学特征,以及脂肪移植对seipin基因敲除小鼠肝脏组织形态学及病理学特征的影响,并探索其发生机制。方法:1.选取seipin+/-雌鼠和seipin+/-雄鼠进行繁殖,然后剪子代的鼠尾,提取DNA,用半定量PCR鉴定基因型。2.选取1月龄和5月龄的WT及seipin-sKO小鼠,通过测量体重、血糖、糖耐量的方法来检测全身性seipin基因敲除对小鼠体重、血糖的影响。3.选取1月龄和5月龄的WT及seipin-sKO小鼠,分离肝脏组织,以肝重与体重的比值来分析seipin基因敲除对小鼠肝脏重量的影响;通过苏木精-伊红（HE）和油红O（oil red O）染色方法来观察seipin基因敲除对小鼠肝脏组织病理学的影响;通过荧光定量PCR法检测肝脏中GPLD1和IGF-1等基因的mRNA水平来分析seipin基因敲除对小鼠肝功能的影响。4.脂肪组织移植（adipose tissue transplantation,AT）4个月后,通过测量WT-sham（WT假手术组）、WT-AT（WT脂肪移植组）、sKO-sham（seipin-sKO假手术组）、sKO-AT（seipin-sKO脂肪移植组）各组小鼠的血糖和糖耐量水平来检测脂肪移植对seipin-sKO小鼠血糖的影响。5.脂肪组织移植4个月后,测量各组小鼠的肝重与体重的比来评估脂肪移植对seipin-sKO小鼠肝脏重量的影响;肉眼观察脂肪移植后各组小鼠肝脏的颜色、大小等指标来评判各组小鼠肝组织形态学变化;HE染色法及油红O染色法观察各组小鼠肝组织病理学变化。运用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肝脏中GPLD1、IGF-1等基因mRNA表达水平评估脂肪移植对seipin-sKO小鼠肝功能的影响。6.脂肪组织移植4个月后,运用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肝脏中GPAT3 mRNA表达水平来评估脂肪移植对seipin-sKO小鼠肝脏中甘油三酯合成的关键酶的影响结果:1.检测1月龄与5月龄WT组和seipin-sKO组小鼠的基本代谢情况。体重检测结果发现,与WT组相比,1月龄、5月龄seipin-sKO组小鼠体重均无统计学差异。血糖结果显示,1月龄seipin-sKO组的血糖水平与WT组相比无明显差异,5月龄seipin-sKO组血糖水平较WT组升高83.58%（P<0.05）。腹腔注射葡萄糖糖耐量（IPGTT）实验结果显示,与WT组相比,1月龄seipin-sKO组小鼠糖耐量无异常改变,5月龄seipin-sKO组糖耐量水平较WT组明显受损（P<0.05）。以上结果均提示seipin敲除会导致5月龄小鼠出现糖代谢异常。2.检测1月龄与5月龄WT组和seipin-sKO组小鼠肝脏组织病理学特征和肝功能。肝重/体重结果显示,与WT组相比,1月龄seipin-sKO组小鼠的肝重与体重的比值无明显改变,5月龄seipin-sKO组小鼠肝重与体重的比值较WT组升高147%（P<0.01）。HE染色和油红O染色结果显示,与WT组相比,1月龄seipin-sKO组小鼠肝脏未见明显脂肪变性和脂滴沉积,5月龄seipin-sKO组小鼠肝脏中可见大量脂肪空泡和橘红色脂滴沉积。荧光定量PCR实验结果显示,与WT组相比,1月龄seipin-sKO组GPLD1和IGF1的mRNA水平均无明显变化,而5月龄seipin-sKO组GPLD1和IGF-1的mRNA水平较对照组相比分别下降了64.32%和43%（P<0.01和P<0.05）。以上结果均提示seipin敲除可能会诱导5月龄小鼠出现肝脏肿大、肝脂肪变性、肝细胞内脂质沉积和肝功能下降等表型。3.检测移植后的脂肪组织对seipin-sKO小鼠糖代谢的影响。血糖水平结果显示,sKO-sham组血糖较WT-sham组显著升高（P<0.01）,sKO-AT组小鼠的血糖比sKO-sham组小鼠血糖水平有明显下降（P<0.01）。腹腔注射葡萄糖耐量试验显示,sKO-sham组小鼠的糖负荷后30及60min时的血糖水平较WT-sham组均升高（P<0.05）,与sKO-sham组相比,sKO-AT组小鼠的糖负荷60min时的血糖水平有下降（P<0.05）。以上结果均提示移植后的脂肪组织对seipin基因缺失小鼠糖代谢异常具有改善作用。4.检测移植后的脂肪组织对seipin-sKO小鼠肝脏组织形态学、组织病理学特征的影响。观察WT-sham组小鼠肝脏颜色,呈红褐色,seipin-sKO组小鼠肝脏颜色呈土黄色,而且体积明显增大,而sKO-AT组小鼠的肝脏体积明显减少,颜色也趋于正常。sKO-AT组小鼠的肝脏与体重比值较sKO-sham组下降（P<0.05）。HE染色及油红O染色法结果显示,seipin基因缺失小鼠的肝组织脂肪变性严重并伴有大量脂质堆积;而脂肪移植后小鼠肝组织脂肪变性明显减轻、脂质堆积明显减少。以上结果均提示脂肪移植对seipin基因缺失小鼠肝脏肿大、脂肪变性、脂质沉积等都具有改善作用。荧光定量PCR实验结果显示,sKO-sham组小鼠的肝组织中GPLD1和IGF-1的mRNA表达水平分别较WT-sham组分别下降了68.26%和39.98%（P<0.01和P<0.05）,而sKO-AT组小鼠的GPLD1和IGF-1的mRNA水平均较sKO-sham组均有提高（P<0.01和P<0.05）,以上结果提示seipin敲除可能会诱导5月龄小鼠出现肝功能下降,而脂肪移植能够改善seipin-sKO小鼠的肝功能。5.检测移植后的脂肪组织对seipin-sKO小鼠肝组织中甘油三酯合成酶的表达水平影响,荧光定量PCR结果显示,sKO-sham组小鼠肝组织的GPAT3 mRNA表达水平较WT-sham组显著升高（P<0.05）,sKO-AT组小鼠肝组织的GPAT3 mRNA水平较sKO-sham组降低（P<0.05）,表明seipin敲除可能会诱导5月龄小鼠肝脏中甘油三酯合成增多进而导致脂质沉积,而脂肪移植能够抑制seipin-sKO小鼠肝脏中甘油三酯合成过程中关键酶的表达进而改善肝脂肪变性的发生。结论:1.全身性seipin基因敲除小鼠在5月龄出现肝脏重量增加,肝脂肪变性并伴有大量脂质沉积,脂肪移植能够明显减轻seipin-sKO小鼠肝脂肪变性程度、减少肝脏中脂质沉积,改善肝功能。2.移植后的脂肪组织可能是通过抑制甘油三脂的合成,从而改善了seipin-sKO小鼠的肝脂肪变性。