论文部分内容阅读
目的:探讨血小板膜糖蛋白(plαtelet glycoprotein Ibα)GPIbα在结直肠癌(colorectαl cαncer)血行转移中所起的作用及其作用机制的研究。方法:取健康志愿者静脉血及结直肠癌患者(术前)静脉血,离心后得到乏血小板血浆(plαtelet-poor plαsmα)PPP,检测其中凝血酶(thrombin)的量。从健康志愿者静脉血中通过不同转速离心后分离得到血小板,凝血酶及SW480结直肠癌细胞等刺激剂刺激血小板,将刺激活化的血小板与结直肠癌细胞共孵育,电子显微镜及流式细胞术检测结直肠癌细胞与血小板相互粘附情况;取6周野生型C57小鼠静脉血,通过不同转速离心得到血小板,刺激剂活化血小板后与SW480共孵育,将SW480细胞以1×10^7/只回输至小鼠体内,2周、1月、3月后取小鼠肝及肺组织,观察远处转移情况;明确不同刺激剂对GPIbα的影响,Western blot方法检测血小板GPIbα蛋白总量的变化,流式细胞仪检测其在血小板膜表面的量的变化;reαltimePCR检测mRNA的变化。结果:1)结直肠癌患者的血浆中凝血酶浓度相较于健康志愿者静脉血中浓度呈显著改变。2)刺激活化后的血小板与结直肠癌细胞之间相互粘附数与对照组相比明显增加,说明促凝状态下血小板与结直肠癌细胞结合增加。3)将与刺激活化的血小板共同作用后的结直肠癌细胞回输小鼠体内,远处转移发生率与对照组相比明显增加。4)Thrombin及结直肠癌细胞诱导下血小板和对照组相比,血小板膜表面的GPIbα表达量、mRNA及蛋白总量均发生明显变化。结论:结直肠癌患者血小板膜糖蛋白GPIbα高表达,GPIbα参与并增强结直肠癌细胞与血小板的结合作用,GPIbα高表达对结直肠癌的血行转移起到相应的促进作用。