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近年来,抗生素在禽畜中的应用日渐广泛,食物中抗生素残留问题,是人们不可忽视、必须严肃对待的重要问题。万古霉素和去甲万古霉素同属糖肽类抗生素,作为抗菌的“最后一线药物”,其药性较强,在其它抗生素对病菌无效时会被使用,被广泛应用于细菌感染的治疗和动物生长。我国禁止万古霉素的兽用,国家卫生部也将万古霉素列入“可能违法添加的非食用物质”名单中。目前国内外关于肉制品、饲料、牛奶、奶粉中万古霉素的检测方法报道较多,尚未见到鸡蛋和蜂蜜中万古霉素与去甲万古霉素的检测方法报道,本文对鸡蛋和蜂蜜中万古霉素及去甲万古霉素的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS\MS）进行研究,该方法专属性好,灵敏度高,适用于禽蛋和蜜类中万古霉素与去甲万古霉素的检测。高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS\MS）是集高效液相色谱（HPLC）对基质复杂的组分的高分离度和质谱（MS）对物质准确定性和高灵敏度于一体的检测分析手段,适用于检测基质复杂的样本。本试验运用HPLC-MS\MS法对鸡蛋和蜂蜜中万古霉素及去甲万古霉素进行检测研究,一方面为国家相关标准的研究提供数据参考,另一方面,为食品安全监管、及时监控和预警提供技术支撑。试验主要研究内容及结果如下:（1）试样提取液配比试验。分别采用0.1%甲酸水:乙腈（V/V）按照2:8,3:7,4:6,5:5,7:3,9:1,10:0配比,按照HPLC-MS\MS法初始条件检测万古霉素及去甲万古霉素。结果显示,5:5与10:0配比提取效果最优,确定0.1%甲酸水作为万古霉素及去甲万古霉素的提取液。（2）净化过程不同净化柱的筛选试验。对六种不同混合阳离子交换固相萃取柱净化万古霉素及去甲万古霉素进行比较,由于样本基质复杂,导致样本溶液浑浊致使提取液过柱困难,固在鸡蛋样本处理时加PSA吸附剂进行处理。筛选确定PCX混合阳离子交换固相萃取柱作为净化柱时回收率较好。（3）洗脱条件的确定。采用两种不同的洗脱液测试,分析洗脱曲线,确定洗脱液用量。确定用3mL 10%氨水-甲醇（V/V）洗脱混合阳离子交换固相萃取柱。（4）检测色谱柱的分离效果比较试验。选取两个不同厂家的C18色谱柱,验证同一种类不同来源色谱柱的分离效果差别,并优选一种C18色谱柱测试两种流动相0.1%甲酸水与乙腈（V/V）和0.1%甲酸水与甲醇（V/V）的分离效果。根据两种C18色谱柱的色谱图比较两者的半峰宽值,确定色谱柱选择X-C18色谱柱,参数为2.1mm×150mm,3.5μm;确定色谱流动相用0.1%甲酸水和乙腈（V/V）,并进行梯度洗脱。测定质谱条件为:质谱仪设定电喷雾电离（ESI）离子源并选择正离子多反应监测（MRM）模式对目标离子进行检测,确定m/z144.1和m/z144.0作为万古霉素与去甲万古霉素的定量离子。（5）试验的基质效应、方法专属性、线性范围、定量限、回收率、精密度和稳定性。方法在5100μg/L范围内呈线性关系,且相关系数（r）大于0.999。该方法定量限（LOQ）均为5μg/kg,万古霉素的检测限（LOD）为1.5μg/kg,去甲万古霉素的检测限（LOD）为0.7μg/kg。样本中万古霉素与去甲万古霉素的平均回收率分别为70.19%94.02%和70.89%93.36%,RSD%分别为2.25%3.13%和3.34%5.57%,表明该方法精确度能够满足检测要求。（6）万古霉素及去甲万古霉素残留检测应用。依托本研究确立的高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS\MS）,对长春市内的鸡蛋和蜂蜜随机抽样检测,未发现万古霉素及去甲万古霉素的残留。显示长春不是万古霉素及去甲万古霉素的污染区。本试验对鸡蛋和蜂蜜中万古霉素及去甲万古霉素的提取、净化条件进行优化,建立的HPLC-MS\MS法操作简单高效,满足对鸡蛋和蜂蜜中万古霉素及去甲万古霉素残留的检测要求,并进行了实际采样分析,未发现长春地区阳性残留。