促红细胞生成素通过SDF-1α介导小鼠骨髓KDR+干细胞自体动员及其对心肌梗死的修复作用及机制研究

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背景急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是冠状动脉粥样硬化的终末事件,是致死和致残的重要原因。心肌梗死的治疗除了传统的药物、冠脉支架和心脏搭桥手术以恢复血供外,利用干细胞促进毛细血管新生是一个正在研究的新方法。有多种细胞因子和药物能够自体动员骨髓内皮祖细胞。促红细胞生成素(erythropoietin EPO)除了能够自体动员造血干细胞,也能动员内皮祖细胞形成新生血管发挥保护心肌梗死的作用。造血干细胞的动员是通过SDF-1α/CXCR4轴实现的,内皮祖细胞的动员是否与SDF-1α/CXCR4轴相关还不清楚。目的探讨促红细胞生成素自体动员骨髓KDR+干细胞对小鼠心肌梗死的修复作用及相关机制。方法用冷冻法制造小鼠急性心肌梗死模型,造模后随机分为以下四组给药:①EPO给药组:心梗+EPO(1000u/kg),②AMD3100(CXCR4特异性的拮抗剂)抑制组:心梗+EPO+AMD3100(EPO:1000u/kg,AMD3100:5mg/kg),③阴性对照组:心梗+PBS,④假手术组:PBS。EPO给药组和AMD3100抑制组于心梗后第1至4天给予EPO,第5天分别给予PBS和AMD3100;阴性对照组和假手术组于术后第1至5天均给予PBS。最后一次给药后1小时流式细胞学检测外周血中KDR+细胞数量。分别于造模后2周和4周免疫组织化学法检测心肌梗死边缘区新生毛细血管数量。结果流式细胞学结果显示:EPO给药组KDR+细胞含量(2.88±0.67)%较阴性对照组(0.68±0.24)%及假手术组(0.62±0.24)%明显增高,而AMD3100抑制组KDR+细胞含量(0.28±0.13)%较EPO给药组明显减少(P <0.05)。免疫组化结果显示:造模后2周和4周,心肌梗死边缘区新生毛细血管数量EPO给药组较AMD3100抑制组和阴性对照组明显增高(P <0.05)。AMD3100抑制组只在造模后2周较阴性对照组增高(P <0.05)。结论EPO能有效动员骨髓KDR+干细胞到外周血中并可能到达心肌梗死边缘区参与新生毛细血管的形成。这种作用能够被AMD3100完全抑制提示EPO自体动员骨髓KDR+干细胞到外周血可能是通过SDF-1α/CXCR4轴实现的。
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