中药穿山龙干预哮喘豚鼠fas、bcl-2凋亡基因表达的实验研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pipiskin
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目的:  通过观察中药穿山龙对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞(Eos)的影响,对其体内炎性因子粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,以及对凋亡促进基因fas与凋亡抑制基因bcl-2 mRNA及其蛋白表达的影响,研究中药穿山龙在拮抗哮喘气道炎症方面的作用,以探讨其治疗哮喘的可能机制。  方法:  采用经典的卵白蛋白注射与雾化吸入致敏激发法建立哮喘豚鼠模型。将50只符合实验标准的豚鼠随机分为5组,每组10只,即正常组、模型组、醋酸泼尼松组、穿山龙组及穿山龙+醋酸泼尼松组,镜下观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中Eos计数的变化及肺组织中Eos浸润等病理表现;免疫组化染色法检测Bcl-2蛋白的表达;用双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定豚鼠血清中GM-CSF、TNF-α细胞因子的含量;RT-PCR法测定豚鼠体内的fas和bcl-2 mRNA水平。  结果:  穿山龙各治疗组豚鼠BALF的Eos计数明显低于模型组;穿山龙各治疗组豚鼠血清中细胞因子GM-CSF、TNF-α浓度明显低于模型组,穿山龙各治疗组豚鼠肺组织匀浆中bcl-2 mRNA浓度明显低于模型组, fas mRNA浓度明显高于模型组,穿山龙各治疗组Eos Bcl-2阳性细胞百分数明显低于模型组,经过统计学处理,与模型组比较,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);而穿山龙+醋酸泼尼松组与醋酸泼尼松组比较,上述结果均无显著性差异(P>0.05);穿山龙各治疗组可改善或明显改善哮喘豚鼠气道粘膜及粘膜下层的炎性细胞浸润。  结论:  1.穿山龙可明显减少哮喘豚鼠肺组织Eos浸润,减轻哮喘气道炎症。  2.穿山龙可诱导促进凋亡基因fas及减少bcl-2mRNA的表达,减少嗜酸粒细胞的Bcl-2蛋白表达,促使Eos凋亡。  3.穿山龙可明显减低细胞因子GM-CSF、TNF-α的含量,减轻哮喘气道炎症。  4.穿山龙可明显增强醋酸泼尼松治疗哮喘的作用,从而减少醋酸泼尼松的用药剂量。
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