成纤维细胞对延边黄牛体细胞克隆效率的影响

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本实验以组织块贴壁率,组织块发育率,组织块的细胞贴壁率为不同生长阶段的衡量标准。着重探讨了不同品种牛的组织块原代培养情况。并对比了原代生长效果对传代后核移植效率的影响。以及不同年龄段和不同部位的延边黄牛成纤维细胞培养情况,及传代后对核移植效率的影响。从而探索出影响体细胞核移植胚胎发育率的新途径-体细胞原代培养效果对核移植的影响。试验结果表明:1.通过半胰酶消化法,获得延边黄牛,黑白花牛,利木赞牛成纤维细胞系,观察其生长状况。在组织块贴壁率上为利木赞好于延边黄牛,延边黄牛好于黑白花。在组织块发育率上为利木赞好于延边黄牛,延边黄牛与黑白花差异不显著。在组织块的细胞贴壁率为利木赞好于延边黄牛,延边黄牛与黑白花差异不显著。2.将传至3~5代的各种牛的成纤维细胞用于供核。观察囊胚率为利木赞显著高于延边黄牛与黑白花。延边黄牛与黑白花差异不显著。3.分别建立延边黄牛胎牛,青年牛,成年牛成纤维细胞系。在组织块贴壁率上胎牛要显著高于青年牛和成年牛,后两者差异不显著。在组织块发育率和组织块的细胞贴壁率。胎牛都显著高于青年牛,青年牛显著高于成年牛。4.将传至3~5代的各年龄段的延边黄牛的成纤维细胞用于供核。观察囊胚率为胎牛高于青年牛,青年牛高于成年牛。5.分别建立延边黄牛成年牛耳部和腹部的细胞系。在组织块贴壁率,组织块发育率,组织块的细胞贴壁率上均为腹部显著高于耳部。6.将传至3~5代的耳部和腹部的延边黄牛的成纤维细胞用于供核,在囊胚发育率上腹部显著高于耳部。7.对比各表发现,无论是不同品种牛还是同种牛不同年龄段和不同部位之间都表现出组织块细胞原代生长效果越好则囊胚发育率越高的特性。
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