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目的:观察TLR9在STZ诱导的糖尿病大鼠脾脏和胰腺中的表达，在不同浓度CpG-ODN激活下，TLR9及其下游信号分子的表达的改变，血清Th1类细胞因子TNF-α、IFN-γ和Th2类细胞因子IL-6的水平变化。探讨CpG-ODN对STZ诱导的糖尿病大鼠TLR9-MyD88通路的影响。 方法:1.取5～6周龄SD雄性大鼠40只，随机分为四组:正常对照组（Ⅰ组），实验对照组（Ⅱ组），低剂量CpG-ODN组（Ⅲ组），高剂量CpG-ODN组(Ⅳ组)。诱导建立1型糖尿病SD大鼠模型采用腹腔注射STZ的方法。除Ⅰ组外，其余3组大鼠均按照60 mg/kg·bw行腹腔注射STZ，注射72h后检测大鼠空腹血糖值。在第-1 d，2d，5d，8d，14d天分别给Ⅲ、Ⅳ组SD大鼠注射60μg/kg·bwCpG-ODN和120μg/kg·bw CpG-ODN，第15d时处死所有大鼠。2.取胰腺，脾脏，组织切片，HE染色观察胰腺组织。3.荧光定量PCR检测大鼠脾脏TLR9mRNA、MyD-88 mRNA、NF-κB mRNA和Western blotting法分析脾脏、胰腺组织TLR9、NF-κB蛋白表达改变。4.采用ELISA法测定血清TNF-α，IL-6，IFN-γ水平的变化。 结果:1.SD大鼠注射STZ24 h后血糖开始升高，3d后“三多一少”症状明显，7d后造模组随机血糖为（Ⅱ组25.28±5.06 mmol/L，Ⅲ组25.87±1.39 mmol/L，Ⅳ组25.72±4.52 mmol/L），正常对照组（Ⅰ组）随机血糖为（5.88±0.66 mmol/L），实验组SD大鼠空腹血糖均＞11.1 mmol/L。第15d时大鼠体重，模型组为(Ⅱ组173.73±5.169，Ⅲ组179.10±3.679，Ⅳ组158.40±8.369)，正常对照组Ⅰ组为（315.20±9.529）。2.胰腺组织病理切片，HE染色后:Ⅰ组胰岛包膜完整，与周围分界清楚，细胞分散均匀，未见炎症细胞浸润;Ⅱ组胰岛形态轻微改变，细胞间隙增加，细胞分布不均匀，有淋巴细胞浸润;Ⅲ组胰岛形态较大改变，细胞间隙扩张水肿，有大量淋巴细胞浸润;Ⅳ组胰岛形态很大程度改变，有萎缩现象，细胞分散，有大量淋巴细胞浸润。3.实时荧光定量PCR结果显示:与正常对照组比，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ组大鼠脾脏TLR9mRNA，MyD88 mRNA，NF-κB mRNA的表达有明显升高，差异有统计学意义（P均＜0.01）。在CpG-ODN刺激下，Ⅲ，Ⅳ组TLR9mRNA，MyD88 mRNA，NF-κB mRNA的表达较Ⅱ组也有明显升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）。Ⅳ和Ⅲ组比较，TLR9 mRNA，NF-κB mRNA的表达量显著升高，差异有统计学意义（P均＜0.05），而MyD88 mRNA两组比较结果差异无统计学意义(P＞0.05)。4.Western blotting结果显示:与正常对照组比较，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组TLR9和NF-κB(p65)蛋白的表达均明显升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）。CpG-ODN刺激下，Ⅲ，Ⅳ组TLR9蛋白的表达较Ⅱ组明显升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）。Ⅳ组较Ⅲ组，蛋白表达显著升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）。5.血清细胞因子测定结果表明:Th1类细胞因子TNF-α和IFN-γ，Ⅱ组和Ⅰ组比较，虽有升高趋势，但无统计学意义（P均＞0.05）。经不同浓度CpG-ODN刺激后，Ⅲ，Ⅳ组与Ⅱ组比较，表达都有显著性升高，差异有统计学意义(P＜0.01)，且Ⅲ和Ⅳ组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。而以IL-6为代表的Th2类细胞因子，Ⅱ组和Ⅰ组比较，虽有升高但无统计学意义(P＞0.05)，Ⅲ，Ⅳ组与Ⅱ组比较也有升高趋势但无统计学意义(P＞0.05)。 结论:STZ诱导的糖尿病大鼠较正常大鼠，TLR9表达增加同时NF-κB表达增加。CpG-ODN激活TLR9-MyD88通路后TLR9、NF-κB的表达在一定浓度范围内呈现剂量依赖性增加。