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目的:观察葛根素联用沙格列汀对STZ诱导的糖尿病模型大鼠血糖及高糖培养的系膜细胞增殖的影响,并探讨联合用药对肾脏纤维化的作用及其机制。方法:(1)体内实验:Wistar大鼠50只,雄性,随机抽取8只作为正常对照组,其余制造糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病对照组,葛根素治疗组,沙格列汀治疗组,葛根素联用沙格列汀治疗组和二甲双胍联用沙格列汀治疗组,各治疗组给予相应药物,两个对照组腹腔注射相应量的生理盐水。第八周后,观察各组大鼠体重、空腹血糖(FBG)、口服糖耐量实验(OGTT)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN);HE染色观察肾脏病理变化,MASSON染色观察肾脏胶原纤维变化,并计算胶原相对面积;ELISA法检测肾脏中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF);分别采用RT-PCR法和Western blot法检测大鼠肾组织TNF-α、MIF与巨噬细胞标记物CD68 m RNA和蛋白的表达。(2)体外实验:以大鼠肾小球系膜细胞株(HBZY-1)为靶细胞,采用体外培养,分为5组:正常糖(5.6mmol/L)组,高糖(30mmol/L)组,葛根素+高糖组,沙格列汀+高糖组,葛根素联用沙格列汀+高糖组。MMT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞周期分布情况,实时定量PCR法检测系膜细胞中TNF-α、MIF与巨噬细胞标记物CD68 m RNA的表达。结果:(1)体内实验:与正常对照组相比,糖尿病对照组大鼠体重下降(P<0.01),FBG、AUC、Hb Alc、FINS、TC、TG、LDLC、Scr及BUN显著上升(P<0.01或P<0.05),HDLC显著下降(P<0.01),血清中TNF-a及MIF含量明显上升(P<0.01),肾脏组织中TNF-a、MIF及CD68 m RNA和蛋白表达上升(P<0.01);与糖尿病对照组比较,葛根素联用沙格列汀治疗组的体重上升(P<0.01),FBG、AUC、Hb Alc、FINS、TC、TG、LDLC、Scr及BUN下降(P<0.01或P<0.05),HDLC上升(P<0.05),TNF-a及MIF含量下降(P<0.05),肾脏组织中的TNF-a,MIF及CD68的m RNA和蛋白表达下降(P<0.05);与单用药组比较,联用组在各指标改善程度上更显著。(2)体外实验:与正常糖组比较,高糖组显著诱导肾小球系膜细胞增殖(P<0.01),TNF-?、MIF与巨噬细胞标记物CD68 m RNA和蛋白表达水平上升;与高糖组比较,葛根素联用沙格列汀+高糖组抑制系膜细胞增殖,差异有统计学意义(P<0.01),可以降低TNF-?、MIF与巨噬细胞标记物CD68 m RNA和蛋白表达水平(P<0.01或P<0.05)。结论:(1)葛根素联用沙格列汀对STZ诱导的糖尿病大鼠有降低血糖,升高血清胰岛素,改善血脂的作用;(2)葛根素联用沙格列汀对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏纤维化的改善具有协同作用,其机制可能与下调TNF-?、MIF及CD68 m RNA及蛋白表达,抑制高糖诱导的系膜细胞过度增殖有关。