论文部分内容阅读
目的：构建同种异体家兔皮肤移植的动物模型；经重组hIL-10蛋白作用后,观察家兔皮肤移植后一般情况、皮片出现排斥的时间和皮片存活的时间；观察家兔皮肤移植后T淋巴细胞亚群的变化,以探讨重组hIL-10在抗皮肤移植机制中的作用。方法：1.家兔皮肤移植实验：受体家兔随机分组,分6组,每组3只,共18只；供体家兔共18只,随机抽取与受体配对。移植前先背部剃毛,切除1.5cm×1.5cm大小面积的中厚皮片进行移植,每只家兔移植2片皮片,缝合固定及单笼饲养。移植前1d开始肌肉注射药物,连续注射,观察术后各组家兔一般情况及皮片的情况。2.流式细胞检测：用荧光双标、直接法分别检测移植前1d,移植后1d,4d,7d,14d,21d,28d各时间段各组家兔外周血中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞数的百分比以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值。结果1.家兔情况：大剂量CsA组术后出现饮食、精神状态欠佳、毛发脱落等现象,其余组均未出现上述现象；皮片情况：术后3天去加压包扎,见敷料干燥,皮片柔软红润,张力适中,周边整齐无渗出,术后4天开始阴性对照组出现排斥现象。2.皮肤开始出现排斥反应时间：低剂量hIL-10组为6.67±2.08 d,高剂量rhIL-10组为9±3.60d,低剂量CsA组为12±1.0 d,高剂量CsA组为19.67±1.15 d,联合组为16.67±1.15 d,阴性对照组为4.33±0.58 d,除低剂量rhIL-10组外,各组和阴性对照组之间差异都有显著意义(p<0.05)。3.皮肤存活时间：低剂量hIL-10组为13.33±3.05 d,高剂量rhIL-10组为16±2.0 d,低剂量CsA组为15.67±0.57 d,高剂量CsA组为21.33±2.52 d,联合组为19±1.73 d,阴性对照组7.67±1.15 d,各实验组与阴性对照组之间差异均有显著意义(p<0.05)。4.在发生急性排斥反应时,CD3+CD4+T淋巴细胞数和CD3+CD4+/CD3+CD8+比值均升高,而CD3+CD8+T淋巴数变化与排斥反应的发生无明显关系。结论：1.动物实验证实rhIL-10对同种异体家兔皮肤移植排斥有抑制作用,可推迟皮片排斥反应出现的时间,可延长移植皮片存活时间,并与CsA有协同作用。2.rhIL-10抑制CD3+CD4+T淋巴细胞活化,通过抑制细胞活化,降低IL-2,IFN-γ的产生,诱导Th1向Th2转化,延缓排斥反应的发生。3.CD3+T淋巴数在移植术后均有不同程度升高,说明在受到外原刺激后引起CD3+活化、增生,CD3+CD4+/CD3+CD8+比值与排斥反应开始出现时间及皮片存活时间均有一定的关系,比值在皮片开始出现排斥反应前升高,在皮片坏死时达到峰值,说明该比值可以监测排斥反应的发生。