帕金森病是一种锥体外系功能障碍引起的的慢性神经退行性疾病。患者大脑的黑质与纹状体的神经细胞受损，导致产生多巴胺的酪氨酸羟化酶下降，造成大脑中多巴胺生成不足。目前常用的临床治疗帕金森病有效药物是左旋多巴。本论文利用林可链霉素基因簇上的lmbB2基因构建生产多巴的工程菌，优化培养条件。并利用易错-PCR，试图提高lmbB2基因表达产物的活性。本文构建了不同的重组质粒，挑选出pCDFDuet-1为lmbB2基因表达的最优表达载体，并对lmbB2基因的表达进行了优化，确定了在IPTG诱导浓度为1mmol/L，诱导时间为8h时，酶的表达水平最好。建立了高效液相色谱检测酪氨酸以及左旋多巴的条件，通过HPLC-MS检测到了发酵样品中确实有左旋多巴。通过培养基的筛选，最终使用以甘油为碳源的M9培养基进行发酵。没有经过代谢改造的大肠杆菌中酪氨酸水平远不能满足lmbB2基因产物的羟化速度，添加底物能增加发酵液中多巴的水平。抗坏血酸的添加能够明显提高酪氨酸的转化率，当抗坏血酸的添加量3g/L，转化率最高可达到92.5%。Fe²⁺，H₂O₂的添加对于基因的表达是有利的。利用易错-PCR，构建突变文库，并建立了快速筛选的方法。通过高产菌的测序以及生物信息学分析lmbB2基因产物的辅酶可能是血红素，催化活性位点可能是，96Gln，133Tyr，139Tyr，148Tyr，160His，170Asp，202His，238Tyr，239Asp，268Asp。这本论文中所建立的工程菌表达效率高，遗传稳定，为进一步优化左旋多巴的发酵工艺以及lmbB2基因的活性位点的预测奠定了基础。