【摘 要】
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利用纤维素酶使大量纤维素资源转变成人类生活所需要的物质，对于解决世界能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有十分重要的意义。另外，生物安全问题随着现代生物技术，特别是重
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利用纤维素酶使大量纤维素资源转变成人类生活所需要的物质，对于解决世界能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有十分重要的意义。另外，生物安全问题随着现代生物技术，特别是重组DNA技术和基因工程的发展而逐渐成为全球关注的话题。利用Cre/loxP系统，删除标记基因（抗除草剂基因），对于生物安全问题具有重要意义。本论文的具体工作如下：
1、利用RT—PCR方法，从绿色木霉菌里克隆出了内切葡聚糖苷酶基因（EGⅡ）和外切葡聚糖苷酶基因（CBHⅡ），序列全长分别为1257bp和1589bp。其蛋白序列长度为418和471氨基酸。外切葡聚糖酶基因（CBHⅡ）具有三个内含子和四个外显子，而内切葡聚糖酶基因（EG）没有发现内含子。
2、通过在EGⅡ基因3’端添加内质网滞留信号（KDEL序列），构建了P3300—35S—EGⅡ—Tnos载体，并将其转入烟草内，经PCR鉴定获得7株转基因植株。
3、利用Cre/loxP系统同雄性不育基因构建表达载体，删除标记基因（抗除草剂基因），并将植物表达载体P3300 Cre/lox—Osg6B—Barnase—Tnos转入到剪股颖内，经PCR鉴定获得6株转基因植株。
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