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目的:本课题通过观察鹿衔草及其中梅笠草素对脑缺血大鼠的保护作用,探讨其作用机制,为临床合理、安全使用鹿衔草中梅笠草素治疗缺血性脑病提供实验数据,同时也为进一步完善中医脑髓理论奠定实验学基础,有助于临床的新药开发。方法:选用健康Wistar大鼠120只,雌雄各半,体重约250-300g。将大鼠随机方式分成四组,每组30只。包括:假手术组(假手术给予生理盐水组);对照a组(手术给予生理盐水组);对照b组(手术给予银杏叶提取物片组);干预组(手术给予鹿衔草或梅笠草素组)。以上动物术前连续给药3d,建立动物模型,应用病理组织涂片、免疫组织生物化学及现代细胞分子学研究方法以及最新的流式细胞分析仪、生物免疫荧光双标法、生物免疫印迹法及生物化学比色法等技术对以下指标进行检测1.脑组织皮质含量及脑梗塞的面积。2.氧化应激反应的相关因子与指标,其中包括NO、MDA。3.免疫组化的相关性指标①有关免疫的细胞检测:粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞同小胶质细胞的静息与活化的比值。②炎症介质:MPO、IL-IP。结果:1、实验一鹿衔草提取物对脑缺血性大鼠水肿及神经功能缺损的影响①实验制备的脑缺血性大鼠模型可靠:在实验大鼠脑组织发生了明确的脑组织损伤(脑梗塞、脑水肿),并伴发神经行为学改变;②鹿衔草提取物对脑缺血性大鼠产生了药理影响性作用:表现为减轻脑水肿和改善大鼠神经行为异常。2、实验二鹿衔草中梅笠草素对脑缺血性大鼠神经组织损伤及其功能的影响(1)实验制备的缺血性中风大鼠模型可靠:在实验大鼠脑组织发生了明确的脑组织损伤(脑梗塞、血脑屏障破坏和脑水肿),并伴发神经行为学改变;(2)鹿衔草中梅笠草素对缺血性中凤大鼠发生了明确的药理学干预作用:表现为减小脑梗塞的面积,减轻脑水肿和血脑屏障损伤程度,改善大鼠神经行为异常。3、实验三鹿衔草中梅笠草素对缺血性中风大鼠氧化应激反应的影响(1)缺血性中风大鼠永久性脑缺血受损皮质组织发生了过氧化反应:MDA含量增加,中性粒细胞NO含量升高,CAT、GSH-Px活性有增高趋势;(2)鹿衔草中梅笠草素可降低缺血性中风大鼠脑缺血受损皮质组织过氧化程度:鹿衔草中梅笠草素可下调MDA含量和中性粒细胞NO含量;上调抗氧化物质CAT、GSH-Px活性;4、实验四鹿衔草中梅笠草素对缺血性中风炎症反应的影响的实验研究(1)缺血性脑中风大鼠产生了明显的炎症反应:伤害侧皮质组织内CD45+的免疫细胞数量增多,巨噬细胞/小胶质细胞被激活数量增多;伤害侧皮质组织内MPO活性及CD68表面抗原蛋白表达量增多;(2)梅笠草素可干预缺血性中风大鼠的炎症反应:下调免疫细胞数量和活化的巨噬细胞/小胶质细胞数量,下调脑缺血造成受损皮质组织MPO活性及CD68表面抗原蛋白表达量。结论:提示:鹿衔草提取物具有一定的神经保护作用;鹿衔草中梅笠草素具有一定的神经保护作用;鹿衔草中梅笠草素干预缺血性中风机制中,抑制氧化应激损伤可能是其机制之一;梅笠草素干预缺血性中风机制中,抑制炎症反应可能是其重要机制之一。