红景天甙对帕金森病轻度认知功能障碍的实验研究

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanzixu
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目的:通过对比红景天甙对正常小鼠及帕金森病认知功能障碍(PD-MCI)小鼠的脑内相应部位的神经元凋亡程度,同时分析对应的多巴胺和乙酰胆碱含量及乙酰胆碱酯酶活性的变化情况,来探究红景天甙对帕金森病认知功能障碍(PD-MCI)的改善作用,并对改善的原因提出相对合理的解读和分析,为PD-MCI进一步的动物研究及临床治疗提供更多的思路。  方法:此亚急性帕金森病动物模型用MPTP作为造模所用药物,选用的小鼠是C57BL/6小鼠。注射MPTP后,对小鼠进行震颤麻痹评测及爬杆实验,此过程我们会观察到小鼠的帕金森病样的急性行为改变,主要是一系列震颤症状,同时爬杆的能力也会有弱化;对小鼠的记忆学习的缺损情况,我们用Morris水迷宫来观察,小鼠的记忆变化主要体现在找寻平台、记忆保持能力等方面;小鼠麻醉灌注后取脑内纹状体,固定石蜡切片后观察细胞凋亡,所用检测方法为TUNEL法;称取纹状体的重量,用高压液相色谱法(HPLC)测纹状体内多巴胺含量及乙酰胆碱含量,观察多巴胺及乙酰胆碱平衡的变化;依照乙酰胆碱酯酶活性试剂盒在分光光度计内比色测OD值,用相应公式求出纹状体内的乙酰胆碱酯酶活性情况;最后统计包括震颤评分等的各项指标的具体数据,采用相应的统计法对数据进行解读、分析和讨论。  结果:在震颤评分中,相比对照组而言,MPTP可以显著增加C57BL/6小鼠的震颤麻痹的症状(P<0.05)。在爬杆实验中,模型组的3d、7d、10d、14d的掉头时间及爬下时间较对照组逐渐延长,有着显著差异(P<0.05);第21天爬杆实验显示,红景天甙组可缩短MPTP导致的小鼠转头时间及爬下时间的延长(P<0.05)。在水迷宫实验中,定向航行阶段的逃避潜伏期,MPTP模型组小鼠较对照组及治疗组有明显延长(P<0.05),而13d的定向航海重测结果显示,MPTP模型组小鼠的逃避潜伏期较对照组及治疗组有明显延长(P<0.05);在空间探索阶段的目标象限时间中,治疗组较MPTP组也有所延长;而与对照组相比,MPTP组及红景天甙组目标象限停留时间均显著缩短(P<0.05),各组小鼠的穿台次数表现中,MPTP组小鼠穿台次数明显减少(P<0.05),而在14d的空间探索重测阶段中,与对照组、治疗组相比,MPTP组小鼠穿台次数及目标象限时间均存在着显著的统计学差异(P<0.05)。在用高压液相色谱仪测纹状体内的多巴胺及乙酰胆碱含量时发现,MPTP组的DA含量明显低于对照组,有极显著性差异(P<0.01),红景天甙组比MPTP组DA含量更多(P<0.05)。MPTP组的脑内纹状体Ach含量比对照组明显增加(P<0.05),红景天甙组Ach含量比起MPTP组有所下降。在乙酰胆碱酯酶活性测定中,与对照组相比,MPTP组及红景天甙组乙酰胆碱酯酶活性明显降低(P<0.05),红景天甙组乙酰胆碱活性较MPTP组有所上升,且两者间存在显著性差异(P<0.05)。在细胞凋亡实验中,与对照组、红景天甙组相比,MPTP可致小鼠纹状体内凋亡细胞数量显著增加(P<0.05),红景天甙组与MPTP组比较可见,纹状体内的凋亡细胞数量有所增加。  结论:1.本实验用MPTP诱导C57BL/6小鼠亚急性帕金森病动物模型,造模成功,而且模型可反映出一定的认知功能损害。2.模型小鼠比正常小鼠存在更多的空间探索能力及学习记忆能力的下降,而红景天甙能够提升小鼠的空间探索能力及学习记忆能力。3.红景天甙可延缓纹状体内的神经元凋亡程度,并改善多巴胺及乙酰胆碱的失衡状态。4.红景天甙可能是通过增强纹状体内的乙酰胆碱酯酶活性,进而起到一定延缓凋亡的作用。5.红景天甙对帕金森病轻度认知功能损害有改善作用。
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