B淋巴细胞刺激因子（B lymphocyte stilulator，BLyS）是一种主要由巨噬细胞和树突状细胞产生的肿瘤坏死因子，广泛参与了机体免疫，对外周B淋巴细胞的生存、成熟和分化，生发中心的形成，浆细胞抗体的分泌等生命过程有着至关重要的作用。BLyS的不正常表达与人类多种疾病相关，如免疫缺陷病，自身免疫性疾病和B细胞淋巴瘤等。研究表明自身免疫性疾病和血液系统恶性肿瘤患者体内的BLyS水平明显升高，而且BLyS信号的阻断对此类疾病的发展有显著的治疗作用。单链抗体（ScFv）既具备抗原结合得特异性，又具有分子量小、穿透力强免疫原性低的特点，在免疫学和生物医学领域有着广阔的应用前景。因此抗BLyS单链抗体具有治疗自身免疫性疾病和B淋巴瘤的潜在作用。本课题研究方法：运用计算机模拟技术设计抗BLyS单链抗体的基因序列（VHL和MHL），用重叠PCR等方法构建重组质粒，借助原核表达系统表达并纯化目的蛋白，通过ELISA技术初步检测抗体的活性。主要研究成果：（一）扩增了两种抗体的重链和轻链可变区，并用重叠PCR方法构建了两种单链抗体基因片段，并且分别添加了Myc标签和Fc标签，VHL-Myc大小为780bp，MHL-Fc大小为1500bp。（二）构建了VHL-Myc-pET28a和MHL-Fc-pET28a表达载体，对蛋白表达的诱导条件进行了优化，获得了较高水平的表达。蛋白大量表达后利用Ni亲和柱从包涵体中纯化出两种目的蛋白。（三）体外活性检测结果显示VHL-Myc能够与特异性BLyS结合，并且这种结合是剂量依赖的。