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肌酸激酶CK是体内能量代谢的关键酶，可逆的催化ATP和磷酸肌酸(PCr)之间高能磷酸键的转移。现已知存在五种组织和亚细胞定位特异的CK同工酶，既胞浆型的脑型肌酸激酶同工酶(CK-BB)、肌型肌酸激酶同工酶(CK-MM)、杂合型肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及存在于线粒体的广泛型线粒体肌酸激酶(ubiquitous MtCK，uMtCK)和肌膜型线粒体肌酸激酶(sarcomeric MtCk，sMtCk)。在体内，线粒体肌酸激酶(MtCK)、胞浆型的CK、Cr及PCr共同组成了细胞内的能量缓冲和转移系统，即CK／PCr循环，对细胞和组织的能量代谢起关键的作用。CK胞浆型同工酶在临床上的诊断意义已被深刻研究且广泛使用，而于1964年被首次报道的MtCK尽管与胞浆型的肌酸激酶同工酶一样催化ATP和磷酸肌酸(PCr)之间高能磷酸键的可逆转移，但MtCK的一级结构、组织定位、动力学性质均与胞浆型的肌酸激酶同工酶不同，特别是其在某些肿瘤病人血清中的高检出率和近年来发现的其在线粒体膜上的与某些通道蛋白的相互作用的新功能引起了许多学者的广泛关注。本研究主要目的是获得uMtCK的融合蛋白制备抗体为今后进一步研究MtCK的在某些肿瘤病人血清中的高表达的原因及分析其是否具有作为检测肿瘤的血清学指标的价值，以及是否可以建立一种免疫学方法代替酶活性测定法而简便、快速的检测MtCK而用于肿瘤的诊断及监测预后。为达到这一研究目的，我们做了以下研究：1)扩增人线粒体肌酸激酶广泛型亚型(uMtCK)的全长基因，将其克隆插入质粒pQE30，构建原核表达载体pQE30-uMtCK质粒。2)在大肠杆菌中诱导表达uMtCK融合蛋白，纯化及鉴定其生物学活性。3)用纯化的uMtCK融合蛋白免疫动物，获得抗uMtCK的多克隆抗体。用自制的抗uMtCK的多克隆抗体检测肿瘤组织切片中的uMtCK。实验结果显示：1)从肿瘤细胞系(Hela细胞)扩增的uMtCK的全长基因与NCBI检索的uMtCK基因序列一致，将其克隆插入质粒而构建了表达载体pQE30－uMtCK。2）uMCK在大肠杆菌中获得了高效表达，且原核表达的uMtCK融合蛋白具有部分酶的生物学活性。3）原核表达的uMCK融合蛋白具有免疫原性，通过免疫兔而获得的抗uMtCK的多克隆抗体在琼脂糖免疫扩散实验和ELISA实验中的抗体效价分别为 1：16和 1：8000。51例胃及直结肠肿瘤标本的免疫组化结果显示：自制的兔抗uMtCK对肿瘤组织中uMtCK的检出率为厂6．5们，显著高于购买的商品化抗uMtCK和抗sMtCK的检出率（52．9％和45．l）。