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随着社会人口的老龄化，心血管疾病已成为严重威胁人类健康的主要疾病。而多种心血管疾病都与心肌纤维化(MF)——心肌成纤维细胞(CFs)增殖有着密切的关系。转化生长因子-β1(TGF-β1)功能异常是多种导致MF因素的最后共同通路，而TGF-β/Smads信号转导通路是TGF-β1发挥生物学作用的主要信号系统。因此，干预TGF-β1信号通路，对预防MF具有重要意义。本研究以TGF-β/Smads信号通路为作用靶点，观察金属硫蛋白(MT)对MF的调控作用及及氧化苦参碱(OMT)的干预作用。 第一部分 MT对体外培养CFs中TGF-β1信号通路的调控作用 目的:研究MT在MF过程中对TGF-β1信号系统的调控作用，为以MT为干预靶位的MF的防治提供实验基础与理论依据。 方法:传代培养CFs，以MTT法确定TGF-β1及MT+TGF-β1作用的最适浓度;正式实验分为对照组、TGF-β1组(20ng·ml-1)、TGF-β1(20ng·ml-1)+MT高剂量(20ng·ml-1)组、TGF-β1(20ng·ml-1)+MT低剂量(10ng·ml-1)组;用Giemsa染色法观察细胞形态;免疫细胞化学法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及Smad2/3的表达。 结果:TGF-β1在20ng·ml-1作用24h时细胞存活率为198％，其A570与对照组比较P＜0.01，促进CFs增殖;TGF-β1(20ng·ml-1)+MT(20ng·ml-1)组及TGF-β1(20ng·ml-1)+MT10(ng·ml-1)组细胞存活率为75.56％和80.00％，显著低于TGF-β1组(P＜0.01、P＜0.01);Giemsa染色结果显示TGF-β1组细胞分裂指数为0.59％，与对照组(0.31％)比较P＜0.01;TGF-β1+MT各剂量组细胞分裂指数(0.28％、0.20％)与TGF-β1组比较P＜0.01、P＜0.01;免疫细胞化学结果显示TGF-β1能显著提高CFs中colⅠ、colⅢ及Smad2/3的表达，平均光密度值与对照组比较P＜0.01; TGF-β1+ MT各剂量组细胞平均光密度值显著低于TGF-β1组（P＜0.01、P＜0.01）。 结论:MT能抑制TGF-β1诱导的CFs增殖，其机制与调控TGF-β/Smads信号转导通路、抑制CFs中colⅠ、colⅢ表达有关。 第二部分 OMT对体外培养CFs中TGF-β1信号通路的干预作用 目的:研究OMT在MF过程中对TGF-β1信号系统的干预作用，为OMT防治MF提供试验基础与理论依据。 方法:传代培养CFs，以MTT法确定TGF-β1(20 ng·ml-1)+OMT作用的最适浓度;正式试验分为对照组、TGF-β1(20ng·ml-1)组、TGF-β1(20ng·ml-1)+ OMT高剂量(2mg·ml-1)组、TGF-β1(20ng·ml-1)+OMT中剂量(1mg·ml-1)组、TGF-β1(20ng·ml-1)+OMT低剂量(0.5mg·ml-1)组;用Giemsa染色法观察细胞形态;以免疫细胞化学法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及Smad2/3的表达。 结果:TGF-β1(20ng·ml-1)+OMT2mg·ml-1、1mg·ml-1、及0.5mg·ml-1时细胞存活率分别为78.17％、83.63％、89.09％，显著低于TGF-β1组（P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05）;Giemsa染色结果显示TGF-β1+OMT各剂量组细胞分裂指数(0.27％、0.25％、0.30％)，显著低于TGF-β1组(P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01);免疫细胞化学结果显示TGF-β1+OMT各剂量组能显著降低TGF-β1诱导的CFs中colⅠ、colⅢ的表达，平均光密度值显著低于TGF-β1组（P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01）;并能显著降低Smad2/3的表达，平均光密度值显著低于TGF-β1组（P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05）。 结论:OMT能抑制TGF-β1诱导的细胞增殖，其作用机制与干预TGF-β/Smads信号通路、抑制CFs中colⅠ、colⅢ表达有关。