油菜是我国第一大油料作物,榨油产量占我国油料总产量40%以上,其副产物菜籽饼粕为高蛋白资源(蛋白含量高达30~42%),年产量非常大,可达1400万吨以上。价格低廉的菜籽饼粕可用于高附加值活性多肽的制备,本课题组开发的菜籽活性多肽已经成功实现产业化,以此为主料生产的多款健康食品深受市场欢迎,消费者使用后发现了诸多在产品开发时未被关注的活性功能,因此,菜籽活性肽相关活性功能系统挖掘筛选的基础研究工作亟待开展。基于这一需求,本文拟从改善睡眠、降胆固醇、降糖降脂、降血压、抗氧化和促进大鼠肝细胞增殖6个方面,系统挖掘筛选菜籽多肽的活性功能,并根据试验结果进行应用技术研究。主要研究工作及结论如下:(1)对菜籽活性肽进行生物学功能挖掘筛选试验研究,改善睡眠试验中,菜籽活性肽显著提高小鼠睡眠率30%、延长小鼠睡眠时间972 s;降胆固醇试验中菜籽活性肽没有显著结合胆酸盐的作用;降糖降脂试验中,菜籽活性肽没有显著降低小鼠血清中空腹血糖、总胆固醇和甘油三酯含量的作用;降血压试验中菜籽活性肽兼具显著降低收缩压和舒张压的功效,灌胃4 h时使收缩压达到最大降幅17.8 mmHg,灌胃6 h时使舒张压达到最大降幅12.3 mmHg;抗氧化试验中,菜籽活性肽在小鼠体内没有显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶含量或降低丙二醛含量的作用;促进BRL细胞增殖试验中,以0.5 mg/mL浓度菜籽活性肽作用BRL细胞12 h能显著促进BRL细胞增殖,增殖率达56.98%。试验结果表明,菜籽活性肽具有良好改善睡眠、降血压和促进BRL细胞增殖功能,而无明显降胆固醇、降糖降脂和抗氧化作用。(2)中药天麻和五味子都有改善睡眠作用,但两味中药大剂量使用存在毒副作用。前期试验发现菜籽活性肽具有提高小鼠睡眠率和睡眠时间的功效,本文将其分别与中药天麻和五味子混合制备复方制剂(菜籽活性肽与天麻或五味子按等质量比充分混合),研究菜籽活性肽分别与天麻及五味子的协同改善睡眠功能。试验结果表明,菜籽活性肽-天麻和菜籽活性肽-五味子两种复方制剂分别能显著缩短小鼠睡眠潜伏期42.7%和32.6%,并延长小鼠睡眠时间77.9%和87.2%。将菜籽活性肽添加到天麻或五味子中制备复方制剂,可保持甚至协同提高改善睡眠小鼠功能,降低天麻或五味子的使用量。(3)卡托普利作为临床降压药物降压速度快且幅度大,但降压效果持续时间短,长期使用副作用大。前期试验发现菜籽活性肽有一定降压功效且效果持续时间长,因此将菜籽活性肽添加到卡托普利中制备菜籽活性肽-卡托普利混合物(质量比50:1),研究其降压功能及机理。试验结果表明,菜籽活性肽、卡托普利及两者混合物均有显著降压功效,两者混合物降压效果优于单独使用,一次性灌胃试验中灌胃菜籽活性肽-卡托普利混合物6 h时收缩压达到最大降幅24.5mmHg;长期灌胃试验中灌胃第三周收缩压达到最大降幅27.3 mmHg。菜籽活性肽、卡托普利及两者混合物主要抑制动脉、肺和肾组织中ACE活性。血清指标表明,菜籽活性肽-卡托普利混合物主要通过降低内皮素、肾素、血管紧张素II含量和提高一氧化氮、一氧化氮合成酶含量发挥降压功效,其上调或下调血清中降压相关化合物的能力优于菜籽活性肽或卡托普利单独使用。将菜籽活性肽添加到卡托普利中制备混合物,在保持降压幅度的同时能延长降压效果持续时间,降低卡托普利使用量。