【摘 要】
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目的:探讨缺氧/复氧致PC12细胞损伤中LPA2受体所发挥的作用及可能存在的研究机制方法:PC12细胞缺氧/复氧损伤通过细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)建造模型。预
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目的:探讨缺氧/复氧致PC12细胞损伤中LPA2受体所发挥的作用及可能存在的研究机制方法:PC12细胞缺氧/复氧损伤通过细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)建造模型。预实验测细胞糖氧剥夺的最适时长:将PC12细胞分为6组,分别为正常组,缺氧3h、6h、9h、12h、15h组,缺氧后放入普通培养箱正常培养24h,做MTT测细胞存活率。将PC12细胞分为5组:正常组、糖氧剥夺(OGD)组、糖氧剥夺+溶剂对照(OGD+DMSO)组;糖氧剥夺+LPA2激动剂(OGD+Dodecylphosphate)组、糖氧剥夺+LPA2抑制剂(OGD+H2L5186303)组.缺氧最适时长后再复氧24h,MTT测细胞存活率,Western Blotting检测LPA2受体及p-akt蛋白表达情况。结果:细胞糖氧剥夺6h后细胞存活率较正常组显著下降(P<0.05),缺氧12h细胞存活率下降50%。糖氧剥夺组相比正常组LPA2受体表达降低(P<0.05),细胞存活率下降(P<0.05);溶剂对照组相比糖氧剥夺组没有统计学差异;激动剂组相比糖氧剥夺组LPA2受体表达显著增高,细胞存活率显著上升,p-akt蛋白表达含量增高(P<0.05);LPA2受体抑制剂组较糖氧剥夺组LPA2表达显著下降。结论:细胞糖氧剥夺6h后细胞存活率较正常组显著下降(P<0.05),缺氧12h细胞存活率下降50%,是模拟再灌注损伤的最适时长。糖氧剥夺组相比正常组细胞存活率和LPA2受体表达均降低;激动剂的加入使LPA2、受体的表达增加,细胞存活率也随之上升。以上结果可以印证LPA2受体在脑糖氧剥夺损伤中发挥保护作用。
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