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目前研究表明,线粒体损伤及细胞凋亡在多种神经系统疾病,如急慢性缺血性脑损伤,Alzheimer’s病(AD)、Parkinson’s病(PD)、Hungtington’s(HD)病的发病机制中发挥着重要的作用。线粒体不仅是细胞内能量的主要来源,而且是细胞内自由基的主要产生地。此外,线粒体还可以通过多种途径参与细胞凋亡过程,包括释放Caspase激活因子(细胞色素C)、改变电子传递、使膜电位丧失、细胞氧化还原状态改变、参与前凋亡或抗凋亡的Bcl-2家族蛋白的形成。因此寻找有效的保护线粒体、抑制细胞凋亡的药物,可以改善能量代谢,降低自由基损伤,减少细胞凋亡,从而对多种神经系统疾病发挥治疗作用。 丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)是由传统中药一丹参内提取出来的有效成分。体内外实验表明,它具有良好的抗氧化作用。本研究采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型和6-OHDA诱导Caspase 3高表达PC12细胞凋亡模型,应用行为学、生化、组化、细胞生物和分子生物等实验方,法,从整体、线粒体、细胞和分子水平等诸多方面观察了Sal B对线粒体功能的保护和抗细胞凋亡作用,并探讨其作用的可能机制。 第一部分:丹酚酸B对大鼠缺血再灌注脑损伤模型的保护作用 采用栓线法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,观察丹酚酸B对大鼠行为学,缺血大脑皮层能量物质ATP、葡萄糖无氧酵解产物以及体内自由基清除剂SOD、GSH和脂质过氧化产物MDA等生化物质的影响。结果表明,大鼠脑缺血前10min静脉注射丹酚酸B 10mg/kg可明显改善由缺血再灌注脑损伤所致的神经症状异常,降低脑缺血再灌注大鼠休克指数,使其在倾斜板上停留的时问延长。同时,丹酚酸B 10mg/kg还可对脑能量代谢产生有益影响,使缺血大脑皮层内ATP含量升高,乳酸堆积减少;