【摘 要】
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目的:检测野生型p73基因第二外显子在人非小细胞肺癌细胞系中的多态性表达,并观察其在顺铂作用下的生物学性状和药物敏感性方面的差异,探讨p73基因多态性与肺癌化疗疗效的关
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目的:检测野生型p73基因第二外显子在人非小细胞肺癌细胞系中的多态性表达,并观察其在顺铂作用下的生物学性状和药物敏感性方面的差异,探讨p73基因多态性与肺癌化疗疗效的关系。方法:采用PCR-RFLP筛选出代表p73基因多态性的G4C14纯合子和A4T14纯合子的肺腺癌细胞株;采用细胞药物敏感性实验(MTT)观察顺铂的抗瘤作用及对细胞形态、超微结构的影响并筛选药物剂量;采用平板克隆形成实验观察细胞生物学性状的变化;采用Hoechst染色和Tunel实验检测顺铂诱导前后两株细胞的凋亡变化。结果:成功筛选出代表p73基因多态性的G/C纯合子细胞株(人肺腺癌P15细胞)以及A/T纯合子细胞株(人肺腺癌A549细胞);平板克隆形成实验显示随着顺铂作用剂量的的提高,两株细胞的克隆形成率均显著降低(P<0.05),但两株细胞克隆形成率之间没有明显差异(P>0.05);MTT实验提示顺铂对两株细胞的半数致死量(IC50):A549为8.9μmol/L,P15为11.6μmol/L;Hoechst染色和Tunel实验显示药物作用后两株细胞出现明显凋亡,但无法确定两株细胞凋亡率存在差异。结论:体外研究表明:人非小细胞肺癌细胞系存在p73基因第二外显子多态性;p73基因第二外显子G4C14-A4T14多态性对肺腺癌细胞的顺铂化疗疗效并无明显影响。
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