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目的:近年来,人们对蜘蛛毒素的研究涉及到多个方面,如镇痛、抗炎、防治心脑血管疾病、抗肿瘤等,但利用蜘蛛毒素治疗脑胶质瘤在国内尚未见报道。本文采用蜘蛛毒素进行脑胶质瘤的体外抑制敏感试验的意义在于为胶质瘤的药物治疗提供多种方法。本研究采用广西虎纹捕鸟妹粗毒素通过对脑胶质瘤的细胞毒作用和机制,并与中华眼镜蛇粗毒素、顺铂抗肿瘤作用的比较,来阐明蜘蛛毒素有可能成为新一代、有效的抗肿瘤药。
方法:用含10%小牛血清的RPMI1640培养液于37℃、5% CO2培养箱湿化孵育U251;然后把对数生长期的细胞株接种到96孔板,并分别加入不同浓度等体积蜘蛛毒素、眼镜蛇毒素及顺铂,每个浓度设3个复孔,空白对照组以同容量培养基代替蜘蛛毒素;采用细胞毒试验(MTT),通过细胞生长抑制率来评价蜘蛛毒素、眼镜蛇毒素及顺铂对U251的细胞毒作用。
结果:虎纹捕鸟蛛毒素、中华眼镜蛇毒素和顺铂对胶质瘤U251均有抑制作用。1.人脑胶质瘤细胞对HWBNSV的细胞毒性作用是敏感的。2.胶质瘤细胞的抑制率与HWBNSV有明显的量效关系,即对传代细胞株产生明显的抑制作用,剂量越大,抑制作用越明显。其48h及72h的IC50(半量抑制浓度)分别为82.60 ug/ml和71.12ug/ml,结果也显示胶质瘤细胞的抑制率与HWBNSV有一定的时效关系;3.U251细胞系对各药物的敏感性来看,三种药物在48h及72h的IC50依次是82.60ug/ml、54.94ug/ml、94.40ug/ml和71.12ug/ml、39.99ug/ml、85.31ug/ml,其中NNAV较HWBNSV、CDDP对细胞株敏感性更强,较其他两者存在显著性的差异(P<0.05)。
结论:本实验通过对胶质瘤体外抑制敏感试验的研究中发现:1.人脑胶质瘤细胞对HWBNSV的细胞毒性作用是敏感的;2.胶质瘤细胞的抑制率与HWBNSV有一定的量效和时效关系;3.HWBNSV能够影响肿瘤细胞的形态,导致细胞调亡;4.U251细胞系对各药物的敏感性来看,HWBNSV相对于NNAV、传统化疗药物如CDDP等来看,作为一种粗毒进行研究,它显示出了较传统化疗药更为敏感的一面,但相对于NNAV粗毒而言其抗肿瘤活性是略显逊色的。胶质瘤