β2糖蛋白Ⅰ在生殖过程中的作用及机制的初步研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiao137wu
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第一部分目的:证实正常女性成熟卵泡液中β2GPⅠ的存在并测定其浓度水平;观察β2GPⅠ在正常对照、PCOS和卵巢储备功能下降患者卵泡液中的表达水平及表达差异,以及正常对照妊娠组和非妊娠组、正常对照不同年龄亚组的表达水平及表达差异;分析β2GPⅠ的浓度水平与IVF/ICSI周期中hCG日血清E2水平、获卵数以及卵成熟率的相关性,探讨β2GPⅠ对卵巢颗粒细胞增殖凋亡发挥的作用。方法:将接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵细胞浆内单精子注射(ICSI)助孕治疗的100例输卵管因素或男方因素女性不孕患者作为正常对照组,并根据妊娠结局分为妊娠组(n=58)和非妊娠组(n=42),根据年龄分为≤25岁组(n=16),26-30岁组(n=35),31-35岁组(n=30)和>35岁组(n=19);同期接受助孕治疗的PCOS患者85例,卵巢储备功能下降患者62例。常规长方案促排卵治疗,收集人绒毛膜促性腺激素(hCG)日血清及取卵日优势卵泡的卵泡液,应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平,电化学发光法测定hCG日血清雌二醇(E2)水平。结果:正常女性成熟卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平为0.53-2.89mg/L,大部分集中于0.8-2.0mg/L浓度范围内;正常对照妊娠组和非妊娠组卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平无显著差异(1.18+0.34vs.1.25+0.33,P>0.05);正常对照≤25岁组、26-30岁组、31-35岁组和>35岁组卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平无显著差异(1.16±0.35、1.27±0.32、1.16±0.43、1.09±0.34,P>0.05),26-30岁组较高,>35岁组较低;PCOS组卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平高于正常对照组,虽无统计学差异(1.47±-0.31vs.1.21土0.41,P>0.05);卵巢储备功能下降组卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平高于正常对照组,虽无统计学差异(1.52±-0.38vs.1.21±0.41,P>0.05);正常对照组卵泡液中β2GPⅠ的浓度水平与hCG日血清E2水平、获卵数及卵成熟率均呈负相关(r=-0.279,P<0.05;r=-0.243,P<0.05;r=-0.711,P<0.01)。结论:正常女性成熟卵泡液中含有β2GPⅠ,其浓度水平与妊娠结局存在负性相关的趋势,其浓度水平与年龄分布有一定的相关性,其浓度水平升高可能提示潜在病理情况的出现;正常生理情况下,β2GPⅠ对卵巢颗粒细胞的增殖凋亡、甾体激素的分泌具有负性调控作用,从而参与卵泡的发育过程。第二部分目的:观察正常女性成熟卵泡液中不同浓度β2GPⅠ作用不同时间后对体外精子活力的影响。方法:选取100例弱精子症患者的精液标本为研究对象,每例精液标本一式4份,1份为生理盐水对照组,其余3份分别与含1.0mg/L、1.5mg/L2.0mg/L β2GP I的正常女性成熟卵泡液于37℃孵育2h,并于30min、1h、2h三个时间点采用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精液常规分析。结果:1.5mg/L (32GPI和2.0mg/L β2GPI作用三个时间点的精子活力增幅△(a+b)%与对照组相比均显著升高(P<0.05);1.0mg/L β2GPI作用30min的△(a+b)%与对照组相比无显著差异(P>0.05),作用1h和2h的△(a+b)%与对照组相比均显著升高(P<0.05);1.5mg/L β2GPI作用30min的△(a+b)%与1.0mg/L组相比无显著差异(P>0.05),作用1h和2h的△(a+b)%均显著高于1.0mg/L组的Δ (a+b)%(P<0.05);2.0mg/L β2GPI作用三个时间点的△(a+b)%显著高于1.0mg/L β2GPI作用三个时间点的Δ (a+b)%(P<0.05);2.0mg/L β2GPI作用三个时间点的△(a+b)%显著高于1.5mg/L β2GPI作用三个时间点的△(a+b)%(P<0.05)。作用30min时,2.0mg/L β2GPI作用的VSL、ALH、LIN、WOB、SRT显著高于对照组(P<0.05);作用1h时,1.5mg/L β2GPI和2.0mg/L β2GPI作用的VSL、ALH、LIN、WOB、SRT均显著高于对照组(P<0.05),2.0mg/Lβ2GPI作用的VSL、ALH、LIN、WOB、SRT显著高于1.0mg/L组的VSL、ALH、 LIN、WOB、SRT (P<0.05);作用2h时,1.5mg/L β2GPI和2.0mg/L β2GPI作用的VSL、ALH、LIN、WOB、SRT均显著高于对照组(P<0.05),2.0mg/L P2GPI作用的ALH、LIN、WOB、SRT显著高于1.0mg/L组的ALH、LIN、WOB、SRT(P<0.05)。结论:正常女性成熟卵泡液中的β2GPI具有提高精子活力的作用,且该作用呈浓度依赖性和时间效应。第三部分目的:观察不同浓度重组β2GPI (rβ2GPI)对体外精子活力的影响,以及rβ2GP I与HBsAg相互作用后HBsAg浓度发生的变化,探讨rβ2GPI在HBV感染弱精子症治疗中的应用价值。方法:选取80例精子活力低下伴有HBV感染的弱精子症患者的HBsAg阳性精液标本为研究对象。每例精液标本一式5份,1份为HBsAg定量对照组,其余4份中1份为生理盐水对照组,3份分别与5umol/L、10umol/L、20umol/L的rβ2GPI于37℃孵育2h,计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精液常规分析,电化学发光法测定HBsAg阳性精液中HBsAg的浓度水平。结果:5umo1/L,10umol/L和20umo1/L的rβ2GPI作用2h的精子活力(a+b)%与对照组相比均显著升高(P<0.05);10umol/L rβ2GPI作用的(a+b)%与5umol/L组相比无显著差异(P>0.05);20umo1/L rp2GPI作用的(a+b)%显著高于5umol/L组和10umol/L组(P<0.05)。10umol/L和20umol/L rβ2GPI作用的VSL、ALH、 LIN、WOB、 SRT均显著高于对照组(P<0.05);20umol/L rβ2GPI作用的VSL、ALH、LIN、WOB、SRT显著高于5umol/L组和10umol/L组(P<0.05)。20umol/L rβ2GPI与HBsAg阳性精液作用2h后,其HBsAg浓度与对照组相比显著降低(P<0.05);5umol/L和10umol/L rβ2GPI作用的HBsAg浓度与对照组相比均无显著差异(P>0.05);5umol/L、10umol/L和20umol/L rβ2GPI作用的HBsAg浓度两两比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:重组β2GPI (rβ2GPI)能够提高精子活力,该作用呈浓度依赖性;rβ2GPI通过与HBsAg相互作用降低HBsAg阳性精液中HBsAg的浓度,为HBV感染弱精子症的治疗提供了新的思路。
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