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连接组蛋白H1foo作为一种特殊的连接组蛋白亚型，其在卵母细胞成熟过程中发挥着重要作用，在GV期的卵母细胞中干扰H1foo的正常表达会引发卵母细胞周期阻滞，从而明显降低卵母细胞的成熟率。另外，在核移植过程中，供体核进入去核的卵母细胞之后，供体核上体细胞型的连接组蛋白H1会迅速地被卵母细胞型的连接组蛋白H1foo置换下来。截止到目前，这种连接组蛋白的置换现象已经在爪蟾，小鼠和牛等不同物种的核移植过程中被观察到，但其具体发生机制还没有完全研究清楚。这种快速置换现象可能对于供体核的重编程过程来讲是至关重要的。为进一步地来研究连接组蛋白H1foo在卵母细胞成熟进程中所发挥的作用，本实验成功构建了小鼠H1foo基因的真核表达载体，并通过在小鼠卵母细胞中超表达H1foo-Venus来观察H1foo的表达上调后对卵母细胞成熟情况及纺锤体形态所产生的影响。同时，为了探索H1foo促进卵母细胞成熟的分子机制，我们对MPF在H1foo上的潜在靶点（T-298）进行了定点突变；另外我们在真核表达载体pH1foo-Venus的基础上结合Tet-On诱导表达系统构建了小鼠H1foo基因四环素诱导的真核表达载体，并在体细胞中进行了诱导表达。试验结果如下：1.本试验利用RT-PCR技术成功从小鼠卵巢组织中克隆得到H1foo CDS全长序列。荧光显微镜观察结果表明构建的真核表达载体pH1foo-Venus可以在细胞中正确表达及定位。在此基础上利用小鼠pH1foo-Venus真核表达载体和pVenus空载体，体外转录获得其mRNA,通过显微注射的方法将mRNA导入小鼠卵母细胞中，在卵母细胞的核区可以观察到H1foo-Venus荧光蛋白的表达和定位。在小鼠卵母细胞中超表达H1foo-Venus和Venus后，H1foo-Venus注射组中卵母细胞的成熟率（54.3%）明显高于Venus注射组（36.25%）。H1foo在T-298位的点突变对H1foo在小鼠卵母细胞中的表达定位没有产生影响。另外，免疫荧光染色结果显示超表达H1foo对卵母细胞中纺锤体的形成没有影响，纺锤体可以正常组装，形态表现正常。2.本试验成功构建了小鼠H1foo基因的四环素诱导表达载体，转染细胞后在特定的时间加入四环素进行诱导，荧光显微镜观察结果显示所构建的诱导表达载体实现成功表达。本试验结果表明：所构建的小鼠H1foo真核表达载体在小鼠卵母细胞中成功表达和定位；在小鼠卵母细胞中超表达H1foo后可以明显促进卵母细胞的成熟；超表达H1foo对于卵母细胞中纺锤体的形成没有明显影响；H1foo在T-298位的点突变对H1foo在卵母细胞中的定位未产生影响；小鼠H1foo基因的真核表达载体和四环素诱导表达载体构建成功；所构建的H1foo基因的四环素诱导表达载体在体细胞中可以实现时间上的调控表达；这为我们进一步研究H1foo在卵母细胞周期进程中的作用机制奠定了基础。