BHK21细胞悬浮培养液筛选及高效价O型口蹄疫生产种毒的制备

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:idoie
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了实现规模化、产业化,达到精密控制生产过程,降低生产成本,便于下游工作及提高生物制品的质量以及安全性,就需要不断改进细胞培养技术,筛选适宜的细胞培养基。本文通过细胞数量、细胞活力、细胞凋亡和细胞可利用率等指标筛选适宜的培养基来提高BHK21细胞数量和质量,进一步通过毒价和146S筛选出适应该细胞敏感的高效价、稳定的优良的口蹄疫O型种毒。将BHK21种细胞分别接种到A、B、C三种培养液中,进行悬浮培养,通过细胞数量、细胞凋亡情况和细胞可利用率等指标,筛选出适合该细胞生长的培养液,结果表明:对该种细胞悬浮培养32 h、36 h和48 h,其在培养液A中细胞凋亡总数占比保持在3.5%8.2%之间,低于培养液C,远低于培养液B,即细胞凋亡一直处于较低水平,生长状态保持平稳。该种细胞悬浮培养10 h、34 h和48 h,其在培养液A中细胞可利用率在97%98%之间,高于培养液B和C。因此该种细胞更适宜在培养液A中生长代谢。对口蹄疫O/Mya98/2010种毒进行驯化,测定各个代次的毒价和146S,最终筛选出最佳代次。贴壁转瓶毒BF9代可作为生产种毒用来进行悬浮毒的驯化,悬浮毒BF11代可作为做生产种毒进行悬浮的放大。选择第一次传代的BF11代作为生产种毒进行放大培养。对悬浮毒进行50L反应器放大培养,经检测TCID50平均为10-7.5/0.1mL,146S平均为3.81μg/mL,较以前得到明显提高(TCID50为10-7.0/0.1mL,146S为1.21.5μg/mL),可达到生产抗原效价标准。
其他文献
基于1980-2017年京津冀地区定时观测资料、欧亚陆面积雪资料、欧洲中期天气预报中心(European Centre for Medium-range Weather Forecasts,ECMWF)再分析资料,美国国家环境预
近日,自治区党委常委、统战部部长段志强到自治区民主党派,自治区工商联走访调研,听取意见建议。自治区统战部常务副部长金满仓、副巡视员李成广及有关处室负责人陪同调研。
目的:探究健脾益气补血汤结合重组人红细胞生成素治疗化疗后贫血临床疗效及安全性。方法:选择符合纳入标准的60例采取化疗治疗出现贫血的肿瘤患者,采取随机数字表法将其分为
一、早春管理技术(一)清洁田园多年生的葡萄蔓上有较多的老皮,老皮翘起或者附着在葡萄蔓上,老皮下面容易隐藏病菌或者虫卵,要在早春集中扒掉,扒掉的老皮要集中收集,并带出田
近年来,船舶的航速与自动化程度都得到提高,船员的编制的减少,使得船舶动力装置越来越复杂,导致了船舶动力装置可靠性的下降,在此针对船舶动力装置可靠性因素进行了论述。
坚持"预防为主、综合防治"的植保方针,树立"公共植保、绿色植保、法治植保"的工作理念,确保农业生产安全与植保工作的健康可持续发展,本文分析了武汉市植保体系中存在的现实
手机用户日益增多,手机充电也成为一个问题,尤其是出差或旅行途中,手机没电的确很不方便,所以自助手机充电站应运而生,但是这款自助服务设备在提供便利时,也存在一系列问题。