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为了实现规模化、产业化,达到精密控制生产过程,降低生产成本,便于下游工作及提高生物制品的质量以及安全性,就需要不断改进细胞培养技术,筛选适宜的细胞培养基。本文通过细胞数量、细胞活力、细胞凋亡和细胞可利用率等指标筛选适宜的培养基来提高BHK21细胞数量和质量,进一步通过毒价和146S筛选出适应该细胞敏感的高效价、稳定的优良的口蹄疫O型种毒。将BHK21种细胞分别接种到A、B、C三种培养液中,进行悬浮培养,通过细胞数量、细胞凋亡情况和细胞可利用率等指标,筛选出适合该细胞生长的培养液,结果表明:对该种细胞悬浮培养32 h、36 h和48 h,其在培养液A中细胞凋亡总数占比保持在3.5%8.2%之间,低于培养液C,远低于培养液B,即细胞凋亡一直处于较低水平,生长状态保持平稳。该种细胞悬浮培养10 h、34 h和48 h,其在培养液A中细胞可利用率在97%98%之间,高于培养液B和C。因此该种细胞更适宜在培养液A中生长代谢。对口蹄疫O/Mya98/2010种毒进行驯化,测定各个代次的毒价和146S,最终筛选出最佳代次。贴壁转瓶毒BF9代可作为生产种毒用来进行悬浮毒的驯化,悬浮毒BF11代可作为做生产种毒进行悬浮的放大。选择第一次传代的BF11代作为生产种毒进行放大培养。对悬浮毒进行50L反应器放大培养,经检测TCID50平均为10-7.5/0.1mL,146S平均为3.81μg/mL,较以前得到明显提高(TCID50为10-7.0/0.1mL,146S为1.21.5μg/mL),可达到生产抗原效价标准。