二氢青蒿素抑制Fe2+依赖的宫颈癌细胞生长及其联合顺铂抗肿瘤作用的实验研究

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研究目的研究二氢青蒿素对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制及促凋亡作用。研究二氢青蒿素能否增强顺铂对Fe2+依赖的人宫颈癌Hela细胞的生长抑制及促凋亡作用。研究方法本研究采用MTT比色法:(1)检测二氢青蒿素和顺铂单药不同药物浓度对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。(2)检测不同浓度二氢青蒿素对不同浓度去铁胺处理6小时后宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。(3)检测二氢青蒿素IC50对不同浓度去铁胺处理6小时后宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。(4)检测二氢青蒿素IC,。联合顺铂不同药物浓度有无增敏作用。(5)检测二氢青蒿素(1C20-IC50)联合顺铂(IC20-IC50)有无协同作用。应用细胞克隆法测定二氢青蒿素(IC20-IC50。)和顺铂(IC20-IC50)单药及联合用药对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。应用流式细胞仪检测二氢青蒿素IC50和顺铂IC50单药及联合用药后宫颈癌Hela细胞的凋亡率。研究结果1、二氢青蒿素和顺铂均以浓度依赖方式抑制Hela细胞的生长。2、二氢青蒿素IC10与顺铂联合作用72小时后对Hela细胞的生长抑制无明显增强,二氢青蒿素对顺铂不存在药物增敏作用(P>0.05)。3、MTT比色法结果示:二氢青蒿素(IC20-IC50)和顺铂(IC20-IC50)联合作用72小时无明显协同作用(P>0.05)。4、二氢青蒿素对去铁胺预处理6小时后宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用与对照组相比随去铁胺浓度增加而降低。5、二氢青蒿素IC50对去铁胺预处理6小时后宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用与对照组相比随去铁胺浓度增加而降低。6、细胞克隆法发现二氢青蒿素(IC20-IC50)和顺铂(IC20-IC50)以浓度依赖方式抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,两者联合有协同作用。7、流式细胞仪检测凋亡结果发现二氢青蒿素、顺铂及联合作用于宫颈癌Hela细胞6小时早期凋亡率分别为(4.33±2.41,%)、(2.35±0.40,%)和(2.90±0.17,%),6小时两药联合与顺铂、二氢青蒿素单药比较诱导Hela细胞早期凋亡作用无显著差异(P>0.05)。二氢青蒿素、顺铂及联合作用于宫颈癌Hela细胞24h早期凋亡率分别为(2.55±0.29,%)、(5.38±0.41,%)和(7.15±0.47,%),24h两药联合与顺铂、二氢青蒿素单药比较诱导Hela细胞早期凋亡作用增强(P<0.05)。顺铂和联合用药作用24小时所诱导的早期凋亡与作用6小时相比明显增强(P<0.05),二氢青蒿素组作用24小时所诱导的早期凋亡与作用6小时相比降低(P<0.05)。研究结论1、二氢青蒿素具有细胞毒性作用,诱导肿瘤细胞凋亡,因此在临床治疗宫颈癌的应用前景很可观。2、二氢青蒿素抗肿瘤与肿瘤细胞内铁离子有关,可将二氢青蒿素与转铁蛋白结合,使铁离子和二氢青蒿素能同时进入肿瘤细胞,产生靶向性抗肿瘤作用。3、二氢青蒿素可增强顺铂抗肿瘤作用,临床上可联合应用于宫颈癌的治疗,减少顺铂用量,降低其毒副作用。
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