人泪液蛋白质组份变化与干眼症的相关性研究

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目的1分析干眼症患者与对照组的干眼症状与临床体征的特点,研究干眼症患者主观症状与客观体征以及临床检查的相关性。2利用先进的iTRAQ联合二维纳米液相色谱--纳米电喷雾串联质谱技术,研究泪液蛋白质组份变化与干眼症的相关性。方法1随机选取2007年12月至2008年8月就诊于我院门诊的患者243例(486眼),通过检查,包括视力、泪膜干涉仪检查,泪液分泌试验(Schirmer testⅠ,SⅠt),干眼问卷调查(dry eye questionnaire,DEQ),15分钟后用裂隙灯检查眼前节,泪膜破裂时间(break-up time,BUT),以及荧光素(Fluorescein,FL)染色检查。共采集干眼症患者126例(252眼),对照组117例(234眼)资料进行相关分析研究。2随机抽取其中干眼症患者12例(12眼),对照组18例(18眼),应用iTRAQ联合二维纳米液相色谱--纳米电喷雾串联质谱技术检测Schirmer试纸采集到的泪液蛋白质。为验证iTRAQ的检查结果,另选两组样本,8例(8眼)干眼症患者以及8例(8眼)对照组,ELISA技术分别检测这两组Schirmer试纸采集到的α-enolase和S100A4蛋白的浓度。结果1干眼组中老年人及女性较对照组多。2干眼症患者最常见的症状是干涩、其次是视疲劳和视力波动。3干眼组与对照组相比,干涩、异物感、视疲劳、眼痛、眼红、视力波动、畏光、眼皮沉重感、痒和不适症状在两组间差异有统计学意义。4干眼组与对照组相比,结膜松弛、睑板腺功能和泪膜碎屑状况的差异有统计学意义。泪膜干涉图像、SⅠt试验、BUT、FL眼表染色在这两组间的差异均有统计学意义。5干眼症患者的症状与年龄、性别、临床体征和临床检查的相关性:1)眼皮沉重与性别有相关性,其余11种症状均与性别无相关性。2)异物感和视力波动与年龄呈正相关,分泌物增多与年龄呈显著性负相关,其余9种症状与年龄均无相关性。3)分泌物增多与SⅠt值呈正相关,流泪与SⅠt值呈显著性正相关,其余10种症状与SⅠt值均无相关性。4)眼痛或眼胀与BUT呈负相关。其余11种症状与BUT值均无相关性。5)眼红与FL眼表染色情况呈正相关,异物感与FL眼表染色情况呈显著性正相关,其余10种症状与FL眼表染色情况均无相关性。6) 12种症状与泪膜干涉图像均无相关性。7)畏光与睑板腺功能不全呈正相关,而干涩和视力波动症状与睑板腺功能呈显著性正相关,其余9种症状与睑板腺功能不全均无相关性。8)异物感与结膜松弛状况呈正相关,其余11种症状均与结膜松弛无相关性。6利用二维纳米液相色谱-纳米电喷雾串联质谱技术,共检测出泪液蛋白质93种。7利用iTRAQ比率鉴定干眼组患者泪液与对照组泪液的差异蛋白,其中有11种蛋白在干眼组与对照组间有明显差异,8种上调,3种下调。8应用ELISA技术证实α-enolase(t-test,p<0.038)和S100 A4(t-test,p<0.027)在干眼症患者Schirmer试纸采集到的泪液中的浓度明显高于对照组。结论1结膜松弛、睑板腺功能不全、泪膜碎屑、SⅠt、BUT、FL眼表着色、泪膜干涉图像是诊断干眼症的重要依据。2干眼症状与体征的相关性较差。3干眼症患者与对照组间的泪液蛋白质有明显差异,提示炎症、眼表细胞凋亡、化生在干眼症发生、发展中的作用。
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