按不同时间方案注射的乙肝免疫球蛋白与乙肝疫苗对小鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响

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目的:观察按不同时间方案注射的乙肝免疫球蛋白(HBIG)与乙肝疫苗对小鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响,进而为探讨母体来源的乙肝表面抗体(抗-HBs)是否影响婴幼儿乙肝疫苗接种后体液免疫和/或细胞免疫效果提供一定的实验依据。方法:饲养BALB/c小鼠120只(60只雄性,60只雌性)。将小鼠按HBIG与第一针乙肝疫苗接种时间间隔分为三大组(0周组、2周组、4周组),每组按接种的乙肝疫苗剂量分为两个亚组(1μg组、2μg组)。每只小鼠于实验开始时(第0周)注射50 IU HBIG。三组小鼠分别于第0周、第2周、第4周注射第一针乙肝疫苗,然后每间隔4周注射第二针及第三针同等剂量的乙肝疫苗。所有小鼠于注射第三针乙肝疫苗后过4周分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞亚群(CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD3-CD19+B淋巴细胞)所占的比例。结果:0周组、2周组、4周组比较,两亚组(1μg、2μg)中均显示,与体液免疫相关的CD3-CD19+B淋巴细胞所占比例在雄、雌鼠中4周组均分别高于0、2周组,差别具有统计学意义(1μg组雄鼠F=7.501,P=0.003;1μg组雌鼠F=14.759,P<0.001;2μg组雄鼠F=13.708,P<0.001;2μg组雌鼠F=13.733,P<0.001);与细胞免疫密切相关的CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞均未显示4周组高于其他两组的趋势。乙肝疫苗1μg组与2μg组比较,在雄、雌鼠中均显示4周组中2μg组CD3-CD19+B淋巴细胞所占比例高于1μg组,差别具有统计学意义(雄鼠t=-2.740,P=0.014;雌鼠t=-2.388,P=0.028);与细胞免疫相关的CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞均未显示2μg组高于1μg组的趋势。不同性别组比较,雄鼠在0周、2周组CD3-CD19+B淋巴细胞比例高于雌鼠。结论:小鼠注射HBIG的前提下,推迟接种乙肝疫苗及增加乙肝疫苗剂量有利于B淋巴细胞增殖,推迟接种乙肝疫苗对T淋巴细胞亚群比例无明显影响,提示来自母体的抗-HBs会影响婴幼儿乙肝疫苗接种后的体液免疫效果。
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