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本论文探讨了绵羊的体内原核胚胎生产、DNA显微注射与移植技术研究,对羊的同期发情、超数排卵、内窥镜法胚胎移植进行了应用研究,同时研究了超排方案、品种、移植胚胎数、季节、TLR4和VP1外源基因等对原核胚生产效率和移植妊娠率的影响,提高了DNA显微注射生产转基因绵羊生产效率,为加快抗病转基因培育奠定了基础。同时对转基因羊血液生理指标和生长发育指标数据进行分析,对转基因后代初步进行转基因羊生物安全评价。试验一为进一步提高优质肉用绵羊采用DNA显微注射法生产抗病转TLR4、VP1基因羊生产效率,本试验比较了CIDR+FSH减量+PMSG、CIDR+FSH等量+PMSG组和CIDR+FSH减量+PG组三种不同超排方案对绵羊超排获得原核胚效率的影响,比较了不同品种对超排获得原核胚效率的影响,超排供体作受体时移植胚胎数对妊娠率、同期发情处理后受体是否发情进行移植比较以及季节对原核注射移植产羔率的影响,注射不同基因对妊娠产羔率及羔羊阳性率的影响。试验结果表明：CIDR+FSH减量+PMSG组供体羊的超排配种后平均黄体数、平均获卵数、平均可用胚数19.40枚／只、17.80枚／只、17.50枚／只显著高于其他两组(P<0.05)；多赛特羊超排效果优于其他三个品种；按体重超排效果较好；供体作受体可有效提高羊只利用率,移入5-7枚原核胚时妊娠率最高(P<0.05),为45.83%,产羔率达200.00%,接近正常受体效率；在秋季即绵羊的繁殖季节受体同期发情后移植妊娠率和阳性率分别为43.10%、51.28%,显著高于春季的妊娠率37.77%、阳性率44.20%(P<0.05)；未发情受体羊的移植妊娠率虽低于发情羊(P<0.05),但可为下一步试验作参考,缩短羊只使用间隔时间、提高利用率；混注基因阳性率高,但妊娠率33.33%显著低于单基因55.93%(P<0.05)。本研究提高了DNA显微注射生产转TLR4、VP1基因绵羊生产效率,获得了大量转基因后代和阳性个体,为下一步扩繁奠定基础。试验二初步进行了转基因羊生物安全评价,对转基因羊生理生化指标进行了检测,通过对转基因羊血液生理指标和生长发育指标的数据分析,初步确定所转基因TLR4、抗口蹄疫蛋白基因VPl对羊生理影响,为转基因生物安全提供参考。在导入TLR4基因经Southern检测最终确定的阳性羊中选取6只做样本与对照组进行比较,数据表明,转TLR4基因羊在生长发育指标上,阳性公羊体重、体长和胸围显著高于对照组(P<0.05),血液生理指标特别是白细胞数上都有提高,但差异不显著(P>0.05),这可能与Toll样受体家族可提高机体免疫力有关。导入抗口蹄疫病毒蛋白VP1基因的阳性羊在生长发育和血生理指标上都与转基因阴性的羊差异不显著(P>0.05)。说明导入抗口蹄疫病毒蛋白基因VP1并未对羊的正常生长产生影响。因此,本研究提高了DNA显微注射生产转TLR4、VP1基因绵羊效率,获得了大量转基因后代和阳性个体,且后代血液生理指标和生长发育指标无不利影响。